雷帕霉素诱导自噬对结肠癌HT29细胞迁移的影响及其分子机制

摘要

目的 探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)诱导结肠癌细胞HT29自噬后对细胞迁移能力的影响,并探讨其分子机制.方法 建立结肠癌细胞株HT-29对照组和RAPA处理的实验组;免疫荧光染色观察细胞自噬现象;划痕实验分析HT29细胞迁移能力;qPCR检测RAPA处理组Snail-1、Snail-2、LEF-1、E-cadherin、N-cadherin mRNA表达水平;Western blot法检测微管相关蛋白LC3和P62表达水平.结果 RAPA处理后的结肠癌HT29细胞可观察到自噬.RAPA诱导自噬组HT29细胞迁移能力减弱(P<0.01).qPCR结果显示Snail-1、N-cadherin mRNA表达水平下降,E-cadherin mRNA表达水平升高,而Snail-2和LEF-1 mRNA表达无显著变化.RAPA处理组与对照组相比,微管相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著上调,微管相关蛋白P62降低.结论 RAPA可通过诱导结肠癌细胞HT29自噬从而抑制其迁移能力,RAPA主要通过调节转录因子Snail-1及其下游效应分子的表达来抑制HT29细胞的迁移.