梨小食心虫细胞色素P450CYP6AE123基因的克隆及表达分析

摘要

细胞色素P450是昆虫体内一类代谢外源物质重要的酶系.为了解梨小食心虫细胞色素P450基因的分子特性及在阿维菌素代谢中的作用,对转录组数据库检索细胞色素P450基因、全长克隆,并对其进行生物信息学分析;并采用RT-qRCR测定目的基因在梨小食心虫不同发育阶段、不同组织及不同浓度阿维菌素处理成虫后的表达量.结果表明,通过克隆结果获得1个梨小食心虫细胞色素P450基因CYP6AE123的全长cDNA序列,开放阅读框(ORF)长1524 bp,编码507个氨基酸;其二级结构表明,该基因编码的蛋白主要由α螺旋和无规则卷曲组成;系统发育分析表明,此基因与苹果蠹蛾、小线角木蠹蛾、棉铃虫的氨基酸序列一致性分别高达83.67％、57.39％、52.61％.RT-qPCR分析结果表明,CYP6AE123在成虫期和5龄幼虫期的表达量较高,且在成虫脂肪体和中肠中有较高的表达.高浓度阿维菌素(179.66μg/mL)处理梨小食心虫后基因表达量显著增加,表明该基因可能在成虫对阿维菌素的解毒代谢中发挥重要作用.研究结果可为进一步通过RNAi进行功能验证提供理论依据.