丹参细胞色素P450基因CYP72A395的基因克隆引物、表达载体、催化功能及应用

摘要

本发明公开了丹参中一条反向调控丹参酮合成的细胞色素P450基因CYP72A395的编码基因序列；本发明所提供的CYP72A395基因具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，所述基因编码蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。本发明检测了CYP72A395的转录表达谱，发现其在丹参花和根周皮高丰度表达；构建了CYP72A395‑RNAi载体及CYP72A395‑过表达(CYP72A395‑oe)载体，通过发根农杆菌介导的丹参遗传转化获得转基因毛状根阳性株系；化学检测分析发现，在CYP72A395‑RNAi株系中，丹参酮类化合物含量升高，而在CYP72A395‑oe株系中，丹参酮类化合物含量显著降低。本发明提供的CYP72A395具有负调控丹参酮类化合物生物合成的功能，可能参与丹参酮生物合成途径的竞争途径。本研究为提高丹参中丹参酮产量提供了新思路，并为丹参酮合成生物学研究奠定基础。