法舒地尔联合过表达趋化因子受体5的间充质干细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用

摘要

目的·研究法舒地尔(fasudil)联合过表达趋化因子受体5(C-C chemokine receptor type 5,CCR5)的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果.方法·小鼠经髓鞘少突胶质细胞糖蛋白第35～55位肽片段(myelin oligodendrocyte glycoprotein peptide fragment 35～55,MOG35-55)免疫后,随机分为EAE模型组(腹腔注射生理盐水)、fasudil干预组(腹腔注射fasudil)、CCR5-MSCs干预组(鼻腔给予CCR5-MSCs)、fasudil联合CCR5-MSCs干预组(鼻腔给予CCR5-MSCs,腹腔注射fasudil),每组8只.MOG35-55免疫后,每日记录EAE临床症状评分.于免疫后第28日处死小鼠,固蓝染色观察髓鞘完整性,免疫荧光染色分析脊髓组织中神经干细胞和少突胶质前体细胞的产生,Western blotting检测脊髓组织中神经营养因子的表达.结果·与其他3组相比,fasudil联合CCR5-MSCs干预组EAE临床症状评分降低(P=0.000,P=0.007,P=0.005),脱髓鞘减轻(P=0.000,P=0.009,P=0.008),脊髓组织中神经干细胞和少突胶质前体细胞的产生增多(均P=0.000),脑源性神经营养因子、胶质细胞源性神经营养因子、神经生长因子和神经营养因子3的表达增加(均P=0.000).结论·Fasudil联合CCR5-MSCs对EAE的治疗效果较fasudil或CCR5-MSCs单独治疗更为显著,可能与其促进髓鞘再生和增加神经营养因子产生相关.