ATM法转黄萎病菌的条件优化及转GFP的单孢的获得

摘要

黄萎病菌入侵棉花植株过程是病菌-宿主互作研究的一个热点与难题。为了研究黄萎病菌的入侵机理,本研究的目的是优化农杆菌的转化真菌方法并将GUS-GFP转入到黄萎病菌中获得转报道基因(GUS-GFP)的黄萎病病菌。实验结果表明:利用农杆菌AGL-1为侵染菌系,以pCAMBIA1304-PV2作为转化载体,ATM方法转化黄萎病菌的最佳条件为:农杆菌与黄萎病的共培养时间为48h,筛选的潮霉素浓度为50μg·mL-1,转化后培养温度22～25℃,培养时间为3～7d。黄萎病菌的转化率约为60～190个转化子/106个孢子。