电转感受态SS320的制备方法及电转条件优化方法

摘要

本发明公开了电转感受态SS320的制备方法及电转条件优化方法，通过将单个大肠杆菌SS320进行培育，然后将培育的菌液在低温条件下进行离心分离，然后沉淀中添加Hepes缓冲液后进行离心分离，再然后向沉淀中添加超纯甘油进行离心分离，向沉淀中加入3.0ml质量分数为20％的超纯甘油，然后使沉淀物重悬，分装后进行冷冻保存，得到电转感受态细胞SS320，然后向电转感受态细胞SS320添加质粒后进行电转，电转完成进行培育，培育后稀释检测；本发明中使用不同浓度超纯甘油培养基重悬细胞沉淀，制备得到较好的感受态细胞，此外也探究了质粒的转化量以及电转条件对转化效率的影响，获得较高的转化效率对应的质粒量。