奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶基因的克隆、序列分析和结构预测

摘要

采用RT—PCR和RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends）法分离出奥利亚罗非鱼卵巢芳香化酶（P450aromA）的全序列，得到1784bp的全长cDNA，包括38bp5’非翻译区，1566bp阅读框以及含Poly（A）信号（AATAAA）的167bp3’非翻译区[不包括Poly（A）]。阅读框共编码521个氨基酸，计算的蛋白质分子量为59ku。同源性分析显示，奥利亚罗非鱼P450aromA的氨基酸序列与其它鱼性腺P450arom具有70％以上的同源性，与其它鱼脑P450arom为60％左右同源，但芳香化酶高保守区包括Ⅰ-螺旋区，芳香化酶特异保守区Ⅱ和血红素结合区Ⅲ和其它鱼芳香化酶的同源性分别高达83％-96％，78％～86％和85—100％。系统发育分析表明奥利亚罗非鱼P450aromA与鱼类性腺P450arom属于同一分支的。生物信息学分析显示：奥利亚罗非鱼P450A基因编码的蛋白无信号肽，无跨膜区域，为非分泌蛋白，同时含有多个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点，N-糖激化位点，N-肉豆蔻酰化位点，蛋白激酶C磷酸化位点。