大鼠膝关节软骨细胞的分离培养与鉴定

摘要

目的 对大鼠膝关节软骨细胞进行分离和培养,观察大鼠软骨细胞的形态学变化.方法 通过酶消化法获得大鼠膝关节软骨细胞并进行传代培养;利用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞形态变化;采用CCK-8法检测软骨细胞增殖能力,利用紫外分光光度法获得OD值评价软骨细胞生长趋势;采用细胞免疫荧光法检测Ⅱ型胶原表达情况,在荧光倒置相差显微镜下对软骨细胞进行鉴定.结果 在酶消化下可获得高纯度软骨细胞,原代细胞多数呈多角形,细胞形态随传代次数增加有变梭形趋势,细胞活力在第三代之后明显减弱,细胞免疫荧光检测显示胶原Ⅱ高表达.结论 成功获得大鼠膝关节软骨细胞并进行形态学的观察比较,P3代前的软骨细胞相对稳定,进行软骨细胞相关研究采用P0至P3代软骨细胞为宜.