脂联素对KGN细胞雌激素合成和氧化应激的影响

摘要

目的探讨脂联素(ADP)对人卵巢颗粒细胞系(KGN)雌激素合成、氧化应激和细胞凋亡水平的影响。方法以KGN为细胞模型,外源添加ADP或联合毛喉素(FSK)处理24 h,同时设置空白对照组,ELISA方法检测细胞中雌二醇和孕酮水平,Western blot方法检测芳香化酶的蛋白表达水平,分析ADP对KGN细胞中雌激素合成的影响;利用氧化应激诱导剂叔丁基过氧化氢(tBHP)与ADP联合或单独处理KGN细胞,同时设置空白对照组,药物处理24 h后,利用DCFH-DA法检测细胞活性氧(ROS)水平,并检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)等氧化应激指标水平,利用MTT和流式细胞仪检测细胞活力和细胞凋亡,分析ADP对tBHP诱导的细胞氧化应激和凋亡的改善作用。结果(1)在FSK存在的前提下,细胞经过ADP处理后,KGN细胞合成的雌二醇和孕酮水平显著上升(P0.05)。(2)ADP对抗tBHP诱导的氧化应激的实验结果显示,与对照相比,添加tBHP后KGN细胞中ROS、MDA水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05)。联合ADP处理可以显著下调tBHP引起的ROS和MDA水平的升高(P<0.05),上调SOD活性(P<0.05);单独ADP处理可以上调SOD1的蛋白表达水平(P<0.05)。(3)流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比,tBHP处理后,KGN细胞凋亡水平显著增加(P<0.05),而联合ADP处理可以显著缓解tBHP引起的细胞凋亡(P<0.05)。结论ADP可能通过影响芳香化酶的表达促进KGN细胞中雌二醇和孕酮的合成;ADP可能通过上调SOD活性,抑制氧化应激,从而缓解tBHP诱导的KGN细胞凋亡。