雌激素对脂肪细胞瘦素脂联素mRNA表达的影响

摘要

目的： 测定不同浓度雌激素对体外培养人大网膜脂肪细胞瘦素、脂联素mRNA表达的影响。 方法： 1.选择择期开腹手术病人,无菌条件下新鲜切取腹部大网膜脂肪组织,经胶原酶消化分离人前脂肪细胞。用DMEM/F12(1:1)培养基在37℃、5％CO2条件下培养,并诱导分化为成熟脂肪细胞。 2.对脂肪细胞进行干预：用不同浓度的雌二醇(1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L)干预24h;选取高浓度组,即雌二醇100nmol/L干预12h、24h、48h。用细胞形态学和油红O染色法鉴定细胞,用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测脂肪细胞瘦素、脂联素mRNA表达水平。 3.数据用均数±标准差(-x±S)表示,采用完全随机设计的单因素方差分析(One-way ANOVA)进行处理,P<0.05为有统计学意义。 结果： 1.成功地培养出人大网膜前脂肪细胞。 培养出的梭形细胞成分均一、增殖旺盛、分化率高,经细胞形态学的动态观察及油红O脂肪染色抽取法的鉴定,证明是功能活跃的前脂肪细胞。 2.半定量RT-PCR法扩增瘦素、脂联素(348bp、124bp),结果表明： ①雌二醇在1nmol/L-100nmol/L范围内以剂量依赖性方式促进瘦素表达,最高达对照组的1.68倍。 ②雌二醇在1nmol/L-100nmol/L范围内以剂量依赖性方式抑制脂联素表达,抑制率最高达对照组的51.8％。 ③雌二醇100nmol/L在12h-48h范围内以时间依赖性方式促进瘦素表达。 ④雌二醇100nmol/L在12h-48h范围内以时间依赖性方式抑制脂联素表达。 3.瘦素与脂联素的表达呈负相关。 结论： 1.使用胶原酶消化的方法分离并原代培养了人大网膜前脂肪细胞,验证了本实验室建立的细胞培养模型的可行性及实用性,为研究各种激素对脂肪细胞因子的作用提供了基础。 2.离体状态下雌激素促进瘦素表达、抑制脂联素表达,为更深入研究肥胖及2型糖尿病发病的性别差异提供依据。

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综述2型糖尿病的性激素变化

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