响应面法优化固定化荧光假单胞菌磷脂酶B的研究

摘要

以脱胶油磷含量为响应值,采用响应面法和Central-Composite设计对制备固定化荧光假单胞菌磷脂酶B(PfPLB)主要工艺参数(海藻酸钠浓度、壳聚糖浓度和加酶量)进行了优化,并且采用回归分析拟合了三个固定化因子与响应值(磷含量)的回归模型.该模型预测最佳的固定化Pf-PLB条件为:海藻酸钠3%,壳聚糖1.14%,加酶量1000 U/kg.研究固定化Pf-PLB的酶学性质,结果表明其最适反应温度为40℃,比游离酶提高15℃;最适反应pH为5.5,比游离酶降低1个pH单位.固定化Pf-PLB具有较好的酶活稳定性,连续反应6次,其相对活性为初始值的51.6%,显示出良好的应用前景.