慢性高原病患者骨髓间充质干细胞的体外扩增及鉴定

摘要

目的探讨慢性高原病(chronic mountain sickness,CMS)患者骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)的体外培养方法、生物功能及分子生物学特征。方法采用密度梯度离心和贴壁筛选法对15例CMS患者(CMS组)和15例正常人(对照组)骨髓MSCs进行分离培养,于倒置显微镜下观察MSCs形态,用流式细胞仪行细胞表面抗原检测,检测MSCs生长情况,测定生长曲线。结果采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(BMMNC)后培养,骨髓MSC均分离培养成功,贴壁细胞呈梭形;两组骨髓MSCs均表达CD29、CD105和CD13,不表达CD45、CD4、CD8、CD14、CD3、CD34、HLA-DR和CD20。CMS组MSCs增殖能力高于对照组(P<0.01),但传代率低于对照组(P<0.05),对P3代细胞生长曲线进行观察发现CMS骨髓MSCs生长较对照组活跃。结论CMS患者骨髓MSCs在体外可有效分离培养,所培养扩增的细胞成分单一,CMS患者骨髓MSCs具有其特有的生物学特性。