miR-429对乳癌细胞增殖和迁移影响及其靶基因初步鉴定

摘要

目的 探讨miR-429在人乳癌细胞系中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响,初步鉴定miR-429的靶基因。方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测miR-429在人乳癌细胞系中的表达。通过MTT实验和划痕实验确定miR-429对人乳癌细胞系MDA-MB-231细胞增殖和迁移的影响。采用生物信息学分析、qPCR和蛋白质印迹方法鉴定miR-429的靶基因。结果 miR-429在人乳癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中低表达。上调miR-429表达后,MDA-MB-231细胞增殖能力被显著抑制(F=33.106,P<0.05),迁移能力明显减弱(F=57.59,P<0.05)。过表达和抑制miR-429后,预测靶基因金属蛋白酶2组织抑制剂(TIMP2)、环磷腺苷效应元件结合蛋白1(CREB1)mRNA表达水平均无明显变化;然而,过表达miR-429后,TIMP2蛋白的相对表达量显著降低(F=33.74,P<0.05)。结论 在MDA-MB-231细胞中,过表达miR-429可抑制细胞增殖和迁移。miR-429的过表达可能通过转录后翻译抑制TIMP2蛋白在MDA-MB-231细胞中的表达,初步鉴定TIMP2是miR-429的靶基因。