大鼠成牙骨质细胞的体外培养及其生物学特性的实验研究

摘要

目的:探讨体外培养源于大鼠磨牙牙骨质的成牙骨质细胞(cementoblast,CMB)的可行性,以期建立能排除牙周其它细胞干扰的CMB体外实验模型.方法:使用组织块结合酶消化的二步法,分别培养来自牙骨质的CMB,来自牙槽骨的成骨细胞(osteoblast,OB)和来自牙周韧带(periodontal ligament,PDL)的成纤维细胞.然后对所培养的细胞分别进行骨钙素免疫组化染色和碱性磷酸酶(ALP)活力测定,并利用茜素红S,检测在条件培养基下细胞形成矿化结节的情况.结果:3种牙周细胞都可从约12周大鼠第一磨牙根周获得进行原代培养.骨钙素在体外培养的CMB和成骨细胞中被强烈表达,在PDL成纤维细胞(PDLC)中几乎不表达.成骨细胞ALP活性最强,在成纤维细胞中适中,在CMB中几乎无活性.CMB形成矿化结节茜素红S染色阳性.结论:CMB可以在体外成功培养,并可与牙槽骨OB、PDLC相区别.CMB在形态和蛋白表达等很多地方与成骨细胞相似,如表达矿化相关蛋白等,但它几乎没有ALP活性;矿化条件下,能在体外形成矿化结节.