尿酸盐刺激下HK-2肾小管上皮细胞PPAR-γ表达及替米沙坦的干预作用

摘要

目的 探讨尿酸盐刺激下HK-2肾小管上皮细胞过氧化物酶体增殖物激活型受体-γ(PPAR-γ)表达及替米沙坦的干预作用.方法 培养HK-2肾小管上皮细胞,随机分为7组,分别为对照组(NC)、模型组(UM)、替米沙坦组(UT)、罗格列酮组(UR)、GW9662组(UG)、替米沙坦+GW9662组(UTG)和罗格列酮+GW9662组(URG),除外对照组应用培养液外,其余6组在对照组基础上均加入600μmol/L尿酸盐溶液培养.各组刺激培养48 h后,细胞融合约90％～95％.流式细胞仪检测HK-2细胞hUAT、PPAR-γ蛋白表达及细胞凋亡率;Q-PCR及western blot检测HK-2细胞hUAT、PPAR-γ、TGF-β1蛋白表达.结果 (1)与NC组相比,UM组肾小管上皮细胞凋亡增加(P<0.05),替米沙坦能减轻凋亡程度(P<0.05),应用PPAR-γ抑制剂后,替米沙坦无法逆转尿酸盐刺激所致HK-2细胞增加(P<0.05).(2)NC组存在hUAT、PPAR-γ表达,与NC组相比,UM、UG组hUAT、PPAR-γ蛋白阳性细胞率、基因及蛋白表达减少(P<0.05),TGF-β1基因及蛋白表达增加(P<0.05);与UG组相比,UT组、UR组hUAT、PPAR-γ蛋白阳性细胞率、基因及蛋白表达增加(P<0.05),TGF-β1基因及蛋白表达降低(P<0.05),与UT组、UR组分别比较,URG组、UTG组hUAT、PPAR-γ 蛋白阳性细胞率、基因及蛋白表达减少(P<0.05),TGF-β1基因及蛋白表达增加(P<0.05).结论 (1)尿酸盐刺激HK-2肾小管上皮细胞PPAR-γ蛋白表达,替米沙坦具有激活PPAR-γ受体作用;(2)替米沙坦能调节尿酸盐刺激肾小管上皮细胞后所致hUAT蛋白下降,起到肾脏保护作用,这种作用是通过PPAR-γ调节肾小管上皮细胞凋亡及TGF-β1蛋白表达实现的.