戊糖多硫酸钠通过抑制P38MAPK通路的激活干预高糖刺激下肾小管上皮细胞的增殖

摘要

目的 观察戊糖多硫酸钠是否通过调控P38MAPK干预糖尿病肾病肾小管上皮细胞 的损伤.方法 利用不同浓度(10 rnmol/L～50 mmol/L)葡萄糖刺激人近端肾小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cells,HK-2)48 h,应用CCK-8比色法检测肾小管上皮细胞增殖的改变.利用不同时间段(0～48 h)葡萄糖刺激细胞,用Western blot法检测P38MAPK蛋白的表达水平,分为正常对照组(CON组)、高糖组(high glucose,HG组,葡萄糖30 mmol/L)、戊糖多硫酸钠(pentosan polysuflate,PPS)组(PPS 200 μg/ml)、高糖+戊糖多硫酸钠组(HG+ PPS组),P38抑制剂组(SB 202190,20 μnol/L),p38抑制剂+高糖组(SB+ HG组)、p38抑制剂+戊糖多硫酸钠组(SB+PPS),刺激48 h后检测HK-2细胞增殖的改变,刺激6h后检测HK-2细胞P38MAPK蛋白的表达水平.结果 高糖刺激下HK-2细胞增殖在30 mmol/L的浓度最高.与HG组相比,加用戊糖多硫酸钠干预能明显抑制HK-2的增殖,差异有统计学意义(P均＜0.01);与正常对照组相比,高糖刺激HK-2细胞6h后磷酸化(p)p38MAPK蛋白表达水平明显增加(P均＜0.01);与HG组相比,HG加戊糖多硫酸钠干预6h后HK-2细胞p-p38MAPK蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P均＜0.05).应用p38MAPK抑制剂SB202190 (20μmol/L)处理细胞,与HG组相比,HG加用SB202190干预能明显抑制p-p38MAPK蛋白表达及HK-2细胞的增殖(P均＜0.05);与PPS组相比,PPS加SB202190干预后p-p38MAPK蛋白表达降低及HK-2细胞数目减少(P均＜0.05).结论 戊糖多硫酸钠可能通过抑制p38MAPK的表达,减少肾小管上皮细胞的增殖而对糖尿病肾病起保护作用.