苹果褪绿叶斑病毒双引物对PCR检测体系的建立及应用

摘要

病毒病在我国苹果树上普遍发生,其中苹果褪绿叶斑病毒(apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)、苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)和苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)最常见,常混合侵染,引起树体衰弱,苹果产量和品质下降,经济损失严重(Cieniewicz&Fuchs,2016)。因此,建立快速、准确的检测技术对病毒病防控具有重要意义。Hu et al.(2015)认为在病毒检测过程中,需要增加检测频率来提高准确率,但也会增加检测成本。针对ACLSV,本研究在常规PCR基础上,增加1对检测引物,为确保高检测效率和准确性、减少扩增程序、降低检测成本,在1个反应体系中同时进行2个目标片段的扩增,建立双引物对PCR检测方法,以期为该病毒的分子鉴定提供技术支持。