LUXTM引物荧光定量PCR检测鹅细小病毒方法的建立与初步应用

摘要

基于引物自身结构的动力学变化对FAM荧光信号的影响,参照GenBank上鹅细小病毒(GPV)B株基因序列设计合成了特异性单一荧光引物(LXXTM引物),建立了定量检测鹅细小病毒的实时荧光定量PCR方法,结果表明,该方法能够检出GPV基因质粒拷贝数达102数量级,检测到的GPV病毒核酸最低量可以达到0.25pg.本方法对鸭瘟病毒(DPV)、雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)和正常鹅胚尿囊液及鹅组织DNA均呈阴性反应.实验室攻毒与临床样品检测结果显示,该方法的特异性和敏感性均能达到试验设计要求,与常规PCR方法比较该方法更敏感、快速、特异,并具有能准确定量、同时检测大量样品的优点.