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梨褪绿叶斑相关病毒RT--PCR检测技术的建立及病毒对梨离体植株生根影响的分析

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摘要

缩略表语

第一章文献综述

1.1侵染梨的常见病毒及其危害特点

1.1.1苹果茎沟病毒

1.1.2苹果茎痘病毒

1.1.3苹果褪绿叶斑病毒

1.2 Emaravirus属病毒及分子特征

1.2.1 Emaravirus属病毒分类地位及病毒种类

1.2.2基因组结构及分子特点

1.3 PCLSaV的生物学特性及危害特点

1.3.1 PCLSaV的生物学特性

1.3.2 PCLSaV的危害特点

1.4病毒侵染对植物生长及生根的影响

1.4.1病毒侵染对植物生长的影响

1.4.2病毒侵染对植物生根的影响

1.5研究目的与意义

第二章PCLSaV的RT-PCR检测技术建立与应用

2.1研究材料

2.1.1样品来源

2.1.2主要试剂

2.2研究方法

2.2.1引物设计

2.2.2梨叶片的总RNA提取

2.2.3 RT-PCR扩增

2.2.4琼脂糖凝胶电泳

2.3结果与分析

2.3.1随机引物反转录PCR及nPCR检测PCLSaV的效果

2.3.2特异引物反转录PCR及nPCR检测PCLSaV的效果

2.3.3不同反转录引物及检测引物用于PCR和nPCR检测PCLSaV的效果比较

2.4小结与讨论

第3章梨离体植株四种病毒的检测

3.1研究材料

3.2主要试剂

3.3研究方法

3.3.1离体植株叶片采集

3.3.2梨叶片的总RNA提取

3.3.3检测4种病毒所用的引物

3.3.4 RT-PCR检测PCLSaV

3.3.5巢式多重RT-PCR检测ASGV、ASPV和ACLSV

3.3.6琼脂糖凝胶电泳

3.4结果与分析

3.4.1巢式多重RT-PCR检测梨离体植株的ASGV、ASPV和ACLSV

3.4.2梨离体植株PCLSaV的巢式RT-PCR检测

3.5讨论

第四章病毒对梨离体植株生根及移栽的影响

4.1研究材料

4.1.1材料来源

4.1.2主要试剂

4.2研究方法

4.2.1激素的配置

4.2.2 MS培养基的配置

4.2.3生根培养基的配置

4.2.4离体植株的生根诱导

4.2.5炼苗与移栽

4.2.6数据分析

4.3结果与分析

4.3.1‘巴梨’无病毒与带病毒离体植株生根移栽效果的比较

4.3.2‘红茄’无病毒与带病毒离体植株生根移栽效果的比较

4.3.3‘色尔克甫’无病毒与带病毒离体植株生根移栽效果的比较

4.4讨论

第五章结论与展望

参考文献

附录

致谢

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