钙化血管细胞凋亡基因的变化

摘要

目的 :观察钙化血管细胞凋亡的现象和细胞凋亡基因的表达 ,以认识细胞凋亡在血管钙化发病中的意义。方法 :利用维生素D3 (VitaminD3 )和尼古丁 (nicotine)制备大鼠血管钙化模型 ,检测血管钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性、45Ca摄入和血管骨钙素含量 ;应用原位缺口末端标记 (TUNEL)、免疫组织化学及DNALadder方法检测钙化血管的凋亡情况 ;应用免疫组织化学方法和3 H TdR参入方法观察钙化血管的增殖情况。结果 :血管的钙含量、ALP活性、45Ca摄取、骨钙素含量均显著增高。钙化血管中存在凋亡细胞 ,表现为细胞缩小、核浓缩、核碎裂等。TUNEL结果显示 ,钙化血管的凋亡指数比正常组高 36 % ,且Caspase 3和Bax的表达明显增强 ;Bcl 2的表达亦高于正常组 ;而NF κB基因表达比正常组低 2 6 %。钙化组可见清晰的DNA阶梯状条带 ,正常组则未出现。钙化组主动脉平滑肌细胞的增殖指数较正常组增加 ,3 H TdR参入量增加了 2 .5倍。结论