烟曲霉shol基因对渗透压传导的作用和抗真菌药物敏感性的影响

摘要

目的:克隆烟曲霉shol基因,并构建烟曲霉shol基因突变株,了解该基因在烟曲霉应对环境变化中的作用.方法:通过基因同源性比对,在烟曲霉基因组中找出与酿酒酵母shol基因同源的基因,PCR扩增烟曲霉shol基因及其上、下游各约1.0 kb的DNA片段,并将其重组到质粒pDHt/SK2中,再利用pyrG作为筛选标记构建重组质粒.将重组质粒转化炯曲霉AF293.1得到烟曲霉△shol.观察烟曲霉△shol和烟曲霉AF293(野生株,wt)在MM、CM、BHI这3种培养基上的生长速度,测定烟曲霉△shol在含有氯化钠、丙三醇这两种渗透压物质培养基上的生长情况,并比较烟曲霉△shol和wt对常用抗真菌药物的敏感性.结果:烟曲霉△shol在CM、MM、BHI这3种培养基上的生长速度均慢于wt;△shol在含渗透压物质小于1 mol/L的培养基上菌落直径没有明显变化,在含渗透压物质大于1 mol/L的培养基上菌落直径明显变小;烟曲霉△shol和wt对抗真菌药物的敏感性没有差异.结论:shol基因影响炯曲霉的生长速度,与培养基类型没有明显关系.烟曲霉shol基因介导渗透压传导.shol基因对烟曲霉的抗真菌药物敏感性没有影响.