昆虫病原线虫共生细菌的分子鉴定及其培养特性的初步研究

摘要

[目的]确定昆虫病原线虫共生细菌YL001和YL002菌株的分类及其系统进化地位,并为该类生物资源的后续研究及开发应用奠定基础.[方法]对YL001和YL002菌株进行分子鉴定,PCR扩增并克隆其16SrRNA全序列.对其全序列进行了序列测定及系统进化分析,并采用参数测定法对其培养特性进行了初步研究.[结果]YL001和YL002菌株与嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophila)种内菌株形成一个类群.序列同源性大于99%.与发光杆菌(Photorhabdus)属内菌株的序列同源性大于94%.2菌株的延缓期、对数生长期、稳定期和衰亡期分别为0～6,6～18,18～66和66 h;培养12 h后,YL001和YL002菌株发酵液的PH值分别降低至5.70和5.56,此后逐渐上升,至发酵结束时其pH值分别为7.74和8.07;培养O～18 h时2菌株发酵液中还原糖含量迅速降低,此后保持稳定;12 h时氨基氮含量达到最低,此后开始缓慢上升;YL001菌株培养54 h后及YL002菌株培养42和66 h后.其对番茄灰霉病菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用最强.[结论] YL001和YL002菌株属于嗜线虫致病杆菌种内的菌株;YL001和YL002菌株的培养特性符合细菌生长和代谢的一般规律,其适宜的发酵周期分别为54和66 h.