大豆种子特异性启动子的克隆及功能分析

摘要

[目的]从大豆中克隆得到β-伴球蛋白α亚基基因的启动子序列7αP,并对其进行功能分析.[方法]利用PCR技术从大豆基因组DNAk中分离β-伴球蛋白α亚基基因启动子序列7αP,将其与GUS基因融合,构建种子特异性表达载体p7αP-GUS,通过根癌农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana tabacum)NC89,对再生植株进行PCR、Southern blot检测和GUS组织化学分析.[结果]序列分析表明,7αP长度为1 382 bp,其中含有多种种子特异性启动子的序列元件,如RY重复序列元件、E-box,SEFl一motif、SEF4一motif、(CA)13.、Dc3启动子结合因子和ACGT序列元件及一些诱导物应答元件.转基因植株的PCR和Southern blot结果显示.成功地获得了转基因阳性植株;GUS活性检测表明,仅能在种子中检测到GUS活性,而在根、茎和叶等其他组织中均未检测到GUS活性.[结论]大豆β-伴球蛋白α亚基基因上游1 382 bp片段具有种子特异性启动子功能,7αP为种子特异性启动子.