沙棘属植物RAPD-PCR反应条件的优化

摘要

采用L16(45)正交试验设计研究了沙棘属植物RAPD-PCR反应中DNA模板浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度和Taq酶含量等5个因素对于PCR扩增效果的影响,并对照温度梯度探讨了退火温度等热循环参数,确定适合沙棘属植物的最佳扩增体系为:模板DNA 1.0 mg·L-1,引物3.0 μmol·L-1,dNTPs 0.1 mmol·L-1,Mg2+ 2.5 mmol·L-1,Taq聚合酶8.33～16.67 nkat;扩增程序中最适退火温度为35～36 ℃.