苎麻属植物RAPD-PCR反应体系的双重正交法优化

摘要

以苎麻属植物为材料,研究苎麻属植物RAPD分析中的主要影响因素,采用差异性材料DNA为模板和双重正交优化设计的方法。建立苎麻属植物RAPD-PCR反应体系:25μL反应体系中含Taq DNA聚合酶1.5U,Mg2+2.1 m mol/L,dNTP 0.2μmol/L,Primer 0.75μmol/L,模板DNA 150 ng。最佳扩增程序:先94℃变性4 min,再94℃变性45 s,37℃复性45 s,72℃延伸90 s共36个循环,最后72℃延伸5 min,4℃保存。经检验,该体系能适应苎麻属多个种植物的RAPD-PCR的正常扩增。