胆汁纳米细菌培养及鉴定

摘要

①目的探讨胆汁中纳米细菌的培养、鉴定方法及微生物学特性。②方法对6例胆结石患者胆汁标本进行纳米细菌培养,观察其生长情况。采用透射电镜、间接免疫荧光染色、Von KOSSA钙染色进行纳米细菌鉴定并采用扫描电镜对其进行能谱分析。③结果 6例胆结石患者胆汁标本纳米细菌培养均为阳性;透射电镜下观察,纳米细菌约为80~350nm,呈椭球形或短棒状,聚集成簇状,其表面被覆细菌被膜;经Von KOSSA法钙染色,其形成的矿化外壳呈黑色;间接免疫荧光染色显示纳米细菌被荧光标记抗体结合,呈绿色荧光颗粒。扫描电镜能谱分析（EDX）显示,纳米细菌外壳含有钙、磷、镁等元素,其钙/磷比值为1.62;④结论胆囊结石患者胆汁中存在纳米细菌感染。纳米细菌体积微小,生长缓慢,能在生理条件下于其菌体表面产生矿化外壳。纳米细菌单克隆抗体联合透射电镜可鉴定纳米细菌,钙染色对纳米细菌的鉴定有着重要的参考价值。