结核分枝杆菌DNA两种提取方法比较

摘要

目的:比较能够满足内切酶分析的结核分枝杆菌染色体DNA提取的两种方法,并结合实验室条件加以改进.方法:称取结核分枝杆菌培养物,灭活后以溶菌酶和蛋白酶K消化后,分别以CTAB/NaCl和酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)抽提,无水乙醇沉淀,紫外分光光度计测定DNA的含量.结果:酚抽提法和CTAB抽提法提取的基因组DNA的得率分别为0.47±0.071,0.41±0.10(‰,W/W).A260/A280的值分别为1.83±0.12,1.89±0.072.结论:用CTAB/NaCl抽提结核分枝杆菌基因组DNA均能满足内切酶及杂交操作的要求,酚抽提法得率稍高,但无统计学意义.CTAB法污染少,省时省材,可代替酚抽提DNA.