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中国北方第十三届实验动物科技年会

召开年：2015
召开地：沈阳
出版时间： 2015-08

主办单位：辽宁省实验动物学会

会议文集：中国北方第十三届实验动物科技年会论文集

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1.体外受精技术在SD大鼠胚胎冷冻保种中的研究
- ZhOU Sheng-lai;周生来;WANG Wei;王维;YU Yang;于洋;YANG Wei;杨葳;ZHANG Mei-ying;张梅英;ZHENG Zhi-hong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨大鼠体外受精技术在SD大鼠胚胎冷冻应用的可行性.rn 方法:选用IVF-20溶液作为大鼠精子获能和受精培养液,mR1ECM溶液作为受精卵培养液,对SD大鼠进行体外受精,以吹卵获得的2-cell胚胎作为对照,并对发育良好的2-cell胚胎实施胚胎冷冻,一周后复苏并对存活胚胎采用输卵管移植.rn 结果:采用吹卵和体外受精的方式分别获得胚胎463和588枚,2-cell胚胎301枚(65.01％)和376枚(63.94％),二者受精率相比无显著性差异(P＞0.05);采用两种方式获得的胚胎各冻存150枚,复苏后形态正常胚胎分别为132枚(88.00％)和130枚(86.66％),二者复苏率比较无显著性差异(P＞0.05);对存活的胚胎各移植5只受体,分别产仔45只和22只,产仔率(32.14％vs16.92％)两者相比较有差异显著(P＜0.05).rn 结论:SD大鼠体外受精技术在胚胎冷冻保种中应用是可行的,将为以后基因工程SD大鼠的胚胎冷冻保种提供技术支持.
2.BALB/c鼠不同体重范围对重组人促红素注射液(CHO细胞)体内活性测定的影响
- 邵宝珠;唐其凤;邵开明
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：本研究以《中国药典》和《欧洲药典》的促红素各论为基础,探讨6～8周龄SPF级BALB/c小鼠,不同体重对变异率的影响.试验设定四组:随机组、18～20g组、15～20g组、16～18g组.试验结果表明体重范围在:16～18g、18～20g测定的结果变异率低.
3.5-脂氧化酶转基因小鼠表型初步研究
- ZHANG Mei-ying;张梅英;杨葳;YANG Wei;DONG Wan-wei;董婉维;ZHOU Sheng-lai;周生来;YU Yang;于洋;WANG Wei;王惟;LV Xiang-chuan;吕相川;郑志红;ZHENG Zhi-hong;WU Hong-lian;吴红联
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立5-脂氧化酶高表达转基因小鼠模型,为动脉粥样硬化发病分子机制的研究提供有应用价值的动物模型.rn 方法:利用5-LO转基因及正常对照小鼠分别选用RT-PCR、免疫组化、血脂、血压等方法进行相关实验.rn 结果:5-LO及FLAP蛋白免疫组化实验结果显示肾、肺中5-LO及FLAP表达转基因小鼠高于正常对照组小鼠;RT-PCR实验结果显示转基因小鼠与正常对照小鼠比较在骨髓细胞、腹腔细胞中、脾脏、肾脏中白三烯介质及其受体均有不同程度的高表达,其中,二者在腹腔细胞和骨髓细胞中LTA4、LTB4、Cys-LTR2相比存在差异(P＜0.05),脾、肾脏中LTB4、LTC4、Cys-LTR2二者存在差异(P＜0.05),Cys-LTR1肾脏中二者存在差异(P＜0.05),CRP、IL-1β、PDGF、NF-κB等细胞因子检测结果在肾组织中转基因小鼠显著高于正常对照小鼠(P＜0.05);血压测定结果显示转基因小鼠高于正常对照小鼠(P＜0.05),血脂检测未见明显差异(P＞0.05).rn 结论:成功建立5-LO高表达转基因小鼠模型.
4.游戏和被动测试对导盲犬培训成功率的预测效果评价
- 张雅丽;ZHANG Ya-li;ZHOU Zi-juan;周子娟;YU Jian-xiong;俞剑熊;HAN Fang;韩芳;WANG Liang;王亮;AI Bo;艾博;WANG Ai-guo;王爱国;WANG Fu-jin;王福金;王靖宇;WANG Jing-yu;JIANG Xin;姜新
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立导盲犬游戏和被动测试的方法和评分标准,并检验其对导盲犬培训成功率的预测效果.rn 方法:参照犬的普通气质测试的方法,结合导盲犬的行为特点,建立测定导盲犬行为的游戏和被动测试方法,采用5个检测行为变量并制定相应的评分标准,分别为游戏测试中的"游戏兴趣,抓取,拔河"与被动测试中的"活跃程度Ⅰ,活跃程度Ⅱ".通过对中国导盲犬大连培训基地的17只导盲犬和17只淘汰犬进行游戏和被动测试,验证其对导盲犬培训成功率的预测效果.rn 结果:统计分析显示,导盲犬与淘汰犬在被动测试变量"活跃程度Ⅰ"的得分具有极显著差异(P=0.003),在被动测试变量"活跃程度Ⅱ"的得分具有显著差异(P=0.014);而在游戏测试变量"游戏兴趣,抓取,拔河"的得分无显著性差异(P＞0.05),但淘汰犬的"游戏兴趣"得分有高于导盲犬的趋势.导盲犬和淘汰犬在1～2分,3～4分和5分3个分数段的分布情况的分析结果表明:在"游戏兴趣"中,得分在1～2分的导盲犬多于淘汰犬,得分为5分的导盲犬少于淘汰犬;而"抓取"中,导盲犬与淘汰犬得分趋势相近;在"拔河"中,得分为1～2分和5分的淘汰犬均多于导盲犬;在"活跃程度Ⅰ"与"活跃程度Ⅱ"中,得分为1～2分的导盲犬均多于淘汰犬,得分为3～4分的导盲犬数量均少于淘汰犬.rn 结论:本文成功建立了游戏和被动测试的方法和评分标准,其中变量"活跃程度Ⅰ"和"活跃程度Ⅱ"可作为预测导盲犬培训成功率的有效指标.
5.Wistar大鼠和SD大鼠的遗传特征分析
- Han Xibin;韩喜彬;Ba Caifeng;巴彩凤;Wang Lixin;王立辛
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:为探究封闭群实验大鼠的遗传质量评价方法,利用下颌骨形态和微卫星检测对辽宁省两单位的wistar大鼠和SD大鼠进行了遗传分析.方法:选取大鼠不同染色体上10个多态信息丰富的微卫星位点,以PCR-PAGE技术进行多态性分析,常规方法测定下颌骨形态学指标.结果:研究表明:两单位wistar大鼠和SD大鼠的下颌骨参数分别有2个和1个差异显著或极显著(P＞0.01或P＞0.05),10个位点的等位基因数、基因型数、杂合度和多态性信息含量都较接近,A单位的wistar大鼠和SD大鼠的遗传多样性略高于B单位.结论:两品系在两单位间的遗传距离相近存在微弱的遗传分化.
6.磨牙石在大、小鼠饲养中的应用
- Lang Xue-Nan;郎雪楠;陈雪婷;Chen Xue-ting;Li zhao-yang;李兆阳;Guo Xiao-chong;郭晓冲;Zhou Sheng-lai;周生来;Wang Wei;王维;张婀娜;Zhang E-nuo;Zhao Wen;赵文
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨磨牙石在大小鼠饲养中对饲料消耗量与动物活动力的影响.方法:C57/BL6小鼠30只和SD大鼠30只按随机数字表法分为对照组和放置磨牙石组,每组5笼15只鼠.每天给予定量饲料,称取和记录消耗饲料量并进行数据对比,实验时间三个月,三个月后进行开场实验,记录分析动物自主探究及活动能力.结果:对照组饲料消耗量明显高于放置磨牙石组,磨牙石成为了大小鼠日常休闲娱乐的玩具,且到实验结束为止对照组与磨牙石组动物在活动力与探究行为上无明显差异(P＜0.05)结论:饲养笼内放置磨牙石既能节约饲料成本还能丰富动物的日常生活,符合动物福利.
7.社会接触测试对导盲犬培训成功率的预测效果评价
- ZHOU Zi-juan;周子娟;张雅丽;ZHANG Ya-li;HAN Fang;韩芳;YU Jian-xiong;俞剑熊;WANG Liang;王亮;WANG Ai-guo;王爱国;WANG Fu-jin;王福金;王靖宇;WANG Jing-yu;JIANG Xin;姜新
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立社会接触测试,并探究其预测导盲犬培训成功率的有效性.rn 方法:通过对犬心理评估(DMA)测试方法进行改良,建立了犬社会接触测试方法及相应的详细评分标准.对中国导盲犬大连培训基地提供的17只培训成功的导盲犬和17只未培训成功的淘汰犬进行社会接触测试,考查和评估社会接触测试中问候、合作及触摸这3个行为变量对导盲犬培训成功率预测的有效性。rn 结果:分析表明:问候变量,导盲犬与淘汰犬的得分没有显著差异(导盲犬:X=3.29,淘汰犬:-X=3.18,P=0.716);而合作和触摸变量,导盲犬的得分显著高于淘汰犬(合作:导盲犬:-X=4.29,淘汰犬:-X=3.41,P=0.005;触摸:导盲犬:-X=3.59,淘汰犬:X=3.00,P=0.049).社会接触测试中,犬的品种和性别对各行为变量的得分没有显著影响(P＞0.05).rn 结论:成功建立了社会接触测试的方法及评分标准,其中合作和触摸可作为有效预测导盲犬成功率的行为变量.
8.SD大鼠超排卵的优化
- 张婀娜;Zhang Enuo;Lang Xuenan;郎雪楠;Zhao Wen;赵文;Chen Xueting;陈雪婷;Dong Wanwei;董婉维;Zhou Shenglai;周生来;Yu Yang;于洋;Wang Wei;王维;张梅英;Zhang Meiying;Zheng Zhihong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:通过对鼠龄及PMSG/HCG激素剂量的控制提高SD大鼠的超排卵效率.rn 方法:分别采用三种不同剂量(P/H: 20IU/20IU、25 IU/25 IU、30IU/30IU)的孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对4、5、6周龄的SD大鼠进行超数排卵处理,以超排总卵数、正常受精卵数、异型卵数作为评判标准,确定最佳超排剂量及鼠龄.rn 结果:20IU剂量时,三种周龄大鼠分别获取胚胎.24.72、33.12、15.22枚,其中正常受精卵:21.58、29.1、13.1枚,异型卵:2.01、1.01、2.12枚;25IU剂量时,三种周龄大鼠分别获取胚胎37.63、40.62、20.78枚,其中正常受精卵22.67、38.6、18.5枚,异型卵:2.82、1.23、2.28枚;30IU剂量时,三种周龄大鼠分别获取胚胎51.69、61.36、30.2枚,其中正常受精卵47.2、60.8、25.6枚,异型卵:1.23、0.56、1.3枚.rn 结论:大鼠5周龄,激素剂量30IU为大鼠超排的最适周龄及最佳激素剂量,为今后基因工程动物制备及胚胎冷冻实验提供技术保障.
9.95％吡蚜酮原药大鼠致畸毒性试验
- 杨光;吕耀中;于佳;呼晶;王微
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研究吡蚜酮原药对大鼠的胚胎毒性和致畸作用.方法:按照GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》应用Sprague Dawley大鼠进行致畸毒性试验,设40、120、360 mg/κg三个剂量组、阴性对照组和135 mg/kg全反式维甲酸阳性对照组,给药时间为大鼠妊娠后第6～15d.结果:以360 mg/ kg经口投予妊娠大鼠,妊娠大鼠的体重增长缓慢,但对胎鼠无影响.结论:吡蚜酮原药无胚胎毒性和致畸作用.
10.皮肤致敏性动物替代模型的研究进展
- 汪岩;王智琴;于峰;王全新;段玉;王冠男;吕耀中;郝依萌
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：皮肤是人体最大的器官,也是外源化学物入侵机体的第一道天然屏障.化学物作用于皮肤常常导致接触性皮肤过敏.传统的评价化学物致敏性的动物试验一般采用豚鼠试验来进行.然而,由于动物试验周期长,花费大,又因动物保护者对动物福利的呼声高涨,合理有效的研制出动物替代模型尤为重要和紧迫。虽然以小鼠替代了豚鼠，但仍在使用实验动物;而体外细胞培养技术，虽然替代了小鼠，但其不能很好的反应出在体内的免疫反应过程，结果没有说服力。因此，仍然需要研究者们继续发现、探索并研究出新型有效的皮肤致敏性动物替代模型。
11.改革实验动物操作基本技能课程实验教学,培养创新型人才
- GONG Yan;弓彦;WANG Chuntian;王春田
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：中医院校开展实验动物操作基本技能课程对于高校人才培养环节中发挥着不可或缺的重要作用.传统的课程实验教学存在一些问题,限制了对大学生创新应用能力的培养.提出一种优化组合大鼠实验内容的教学改革方法,有助于高校为社会培养更多实践能力强的创新型高素质人才.
12.关于小鼠脑内注射不同位置深度的讨论
- 汪辉;马云珠;呼晶;于峰
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：小鼠脑内注射常用于微生物学动物实验,即将病原体等接种于被检动物脑内,观察接种后的各种变化.目前《中国药典》2010年版规程中仍主要以小鼠注射法评价微生物生物学实验结果.而影响小鼠脑内注射实验结果的因素有很多,包括环境、小鼠的质量、饲养条件、试验技术人员的操作技术水平及其熟练程度等,其中实验人员的操作技术影响是最可以做出改变的.本文主要从动物实验的操作技术即小鼠脑内不同注射部位、进针深度以及拔针的方式等方面观察其对实验结果的影响,以使结果更加客观、科学、准确,最大限度地减少人为的误差.
13.镇痛剂对豚鼠45d皮肤变态反应(致敏)试验研究
- 吕耀中;陆思博;王智琴;于峰;王微;孙晓光;邰婷婷;王可宇;张宇;孔丽娟
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:测试镇痛剂对豚鼠皮肤是否致敏.rn 方法:试验采用Buehler斑贴法,使用豚鼠50只,共分4组,即受试物诱导组和非诱导组各15只,阳性对照物诱导组和非诱导组各10只.受试物诱导剂量和激发剂量分别为每只受试动物0.2ml和0.02ml,阳性对照物诱导剂量及激发剂量分别为0.6％和0.05％的2,4-二硝基氯苯(80％乙醇作溶媒,W/V).试验期间对各受试动物一般状态、给药部位皮肤有无异常进行观察,并于激发给药后24及48小时对受试动物涂药部位皮肤红斑和水肿进行评分,求出致敏率.rn 结果:本试验受试物诱导组及阳性对照物诱导组受试动物皮肤致敏率分别为0％和100％.rn 结论:镇痛剂致敏率强度为Ⅰ级,属于弱致敏物.
14.95％草铵膦原药对大鼠致畸试验
- 吕耀中;牛志刚;王昂;李彦杰;唐连凯;王希友;周俐俐;郝依萌;王雯卉;呼晶;杨光
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:检测95％草铵膦原药对妊娠大鼠是否有母体毒性,胚胎毒性以及致畸毒性.rn 方法:根据相关资料及预试结果,设计了10、30、90mg/kg·d三个剂量组,同时设一个阴性对照组和一个阳性对照组.对妊娠大鼠在妊娠第6天至第15天经口灌胃给药(受孕当天为妊娠第0天).于动物妊娠第20天脱颈椎处死后,立即剖腹取出子宫并称量子宫连胎重(即子宫、胎鼠和胎盘的总重量),记录黄体数、活胎数、死胎数和吸收胎数;检查活胎性别,观察其外观畸形;测量胎鼠的身长、尾长、体重和胎盘总重量.胎鼠经相应处理后进行内脏和骨骼检查.并对各项检查检测指标进行统计学处理.rn 结果:在本试验条件下,经口灌胃给予95％草铵膦原药10、30、90mg/kg·d时,可引起妊娠大鼠的体重增长放缓.经口灌胃给予95％草铵膦原药10、30、90mg/培·d时,对胎鼠的胸骨发育有一定影响,使其发育迟缓.在本试验条件下未发现95％草铵膦原药对SD大鼠的致畸毒性.rn 结论:在本试验条件下,可引起大鼠的母体毒性,使胎鼠的生长发育迟缓,未发现95％草铵膦原药对SD大鼠的致畸毒性.
15.皮肤给药在药物临床前安全性评价中的研究进展
- 王福鑫
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:结合当前对药物临床前安全评价中皮肤毒性试验的应用研究进展进行综述.方法:通过简要介绍皮肤的结构,化学物质透过皮肤屏障后的体内转运过程,接着对经典的皮肤毒性体内试验应用现状进行阐述.结论:皮肤给药方法在药物毒性评价中应用广泛,对其动物实验中的给药方法进行改进和替代研究具有重要的现实意义.
16.UBE2C基因在斑马鱼胚胎发育中的时空表达规律
- HU Yue-yang;胡月阳;XU Ming-zhi;徐明志;WANG Peng-fei;王鹏飞;ZHU Yan-bo;祝岩波;LIU Chao;刘超;WANG Junxia;王俊霞
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:观察ube2c基因在斑马鱼胚胎发育不同时间点的表达规律,以便今后对其功能作用进行进一步的研究.rn 方法:选择受精后0小时(hour post fertilization,hpf)、2hpf、4hpf、8hpf、12 hpf、24hpf、48hpf、72hpf及7dpf(day post fertilization,dpf)的斑马鱼鱼卵,提取RNA、反转录后进行Real-Time PCR对ube2c在不同时间段的表达进行检测;通过合成的地高辛标记反义ube2c RNA探针,对以上各时间段胚胎进行整胚原位杂交,观察ube2c在斑马鱼胚胎发育过程中的时空表达规律.rn 结果:Real-TimePCR结果显示,发现ube2c在0hpf(1-cell)即有表达,4hpf(囊胚期)其表达最高,在孵化期(48hpf)之后则降低到较低水平.整胚原位杂交显示,0hpf即可检测到ube2c的表达信号,并集中在胚盘处;从卵裂期(0.75-2.25hpf)直到12hpf,ube2c均呈广泛性分布;24 hpf开始,表达信号呈现一定组织特异性,在48hpf之后,信号主要集中耳囊、肝、生殖系等处.rn 结论:斑马鱼ube2c的表达具有明显的母源表达特征,推测其可能通过参与母源蛋白的泛素化降解来调控胚胎的发育,其在耳囊、肝、生殖系等组织器官的特异性表达也为UBE2C在胚胎发育中的功能研究提供了研究方向，对胚胎发育过程的研究对了解相关肿瘤的发生发展机制具有重要指导作用。
17.山楂叶总黄酮对麻醉开胸犬血流动力学及心肌耗氧量的影响
- Zhang Da-wei;张大维;徐彩云;Xu Cai-yun;Sun Jian-feng;孙剑锋;Zhang Yi-he;张逸鹤;Yang Shi-jie;杨世杰;Xu Yan-ru;许艳茹;Shi Ju;石菊;宫余静;Gong Yu-jing;Qu Xin-yao;曲芯瑶
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研究山楂叶总黄酮对麻醉开胸犬血流动力学及心肌耗氧量的影响.方法:将正常犬随机分为空白对照组、复方丹参注射液组、山楂叶总黄酮大、中、小剂量组.通过多导记录仪测定总外周阻力、冠脉阻力、心排出量、心搏出量、心肌血流量、心搏指数、心肌耗氧量、心肌耗氧指数及心肌氧摄取率的变化情况.结果:山楂叶总黄酮大剂量组对总外周阻力、心排出量、心搏出量、心搏指数变化作用明显,与空白组变化百分率比较,差异具有统计学意义;山楂叶总黄酮大、中、小剂量组对冠脉阻力、心肌血流量、心肌氧摄取率变化作用明显,与空白组变化百分率比较,差异具有统计学意义.结论:山楂叶总黄酮能改善心肌缺血麻醉犬的血流动力学参数,改善心脏功能.
18.杞菊地黄软胶囊对环磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫调节的影响
- Zhang Da-wei;张大维;徐彩云;Xu Cai-yun;Xue hui;薛辉;Zhang Yi-he;张逸鹤;Yang Shi-jie;杨世杰;Xu Yan-ru;许艳茹;Shi Ju;石菊;宫余静;Gong Yu-jing;Qu Xin-yao;曲芯瑶
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:观察杞菊地黄软胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法:采用环磷酰胺法制备小鼠免疫抑制模型,测定各剂量组小鼠的淋巴细胞转化功能、NK细胞杀伤能力,及IL-2和TNF-α的活性.结果:与模型组相比,杞菊地黄软胶囊各剂量组小鼠,在T、B淋巴细胞转化能力、NK细胞杀伤率、及IL-2和TNF-α的活性等方面,均显著提高.结论:杞菊地黄软胶囊对免疫抑制小鼠具有增加免疫功能的作用.
19.慢性肝炎肝郁脾虚证动物模型的建立
- 王鑫;刘博;温富春;纪凤兰;丁涛;徐惠波
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:通过对大鼠注射CCL4和慢性束缚应激的综合方法,观察其行为状态和机体生理生化指标的变化,制备慢性肝炎郁脾虚证动物模型,并用经典治疗药逍遥丸化裁方干预,对模型进行验证.rn 方法:大鼠适应性饲养一周后分为A(空白组),B(模型组),C(逍遥丸化裁方组)三组.除A组大鼠外,其余大鼠皮下注射10％ CCL4豆油溶液.以慢性束缚方法制作慢性应激大鼠模型,将B、C组大鼠束缚于束缚筒内,放入饲养箱中,每日3h,连续21d.观察实验动物的情绪行为、日饮用量、大便溏薄观察、自主活动能力.给药后每周灌服D-木糖接取尿液检测尿液中D-木糖排泄率.检测血清中生化指标的水平,观察肝脏病理变化,所有指标进行组间t检验统计学处理.rn 结果:试验结果显示大鼠出现易怒、便溏等行为状态变化;血中神经递质5-羟色胺(5-HT)降低、多巴胺(DA)升高;血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AsT)升高,总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、生长抑素(SS)、胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)降低;尿液中D-木糖含量降低;其变化及临床表现与慢性肝炎肝郁脾虚证临床症状基本相符,给予逍遥丸化裁方组动物上述指标明显好转。rn 结论：证明慢性肝炎郁脾虚证动物模型基本成立.
20.模式生物在肿瘤模型动物建立中的应用
- HUANGFU Bing;皇甫冰;SONG Guo-hua;宋国华
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：肿瘤学研究发展与模式生物应用密不可分.肿瘤是一个系统性疾病,诸多肿瘤的发生、发展和转移缺乏真正意义上的整体研究模型,成为肿瘤学研究过程中的主要障碍,各种模式生物所建立的肿瘤动物模型很好的解决了这个问题.近年来,RNA干扰技术的提出与发展,使模式生物更为广泛地应用于各种肿瘤动物模型的建立.本文介绍了模式生物的特点，分析了肿瘤动物模型建立方法，化学诱导剂法、肿瘤组织块移植法等，分析了鼠类、斑马鱼等模式生物在肿瘤动物模型中的应用。
21.大鼠实验操作的经验和体会
- 王微;吕耀中;李丹;陆思博;王希友;郝依萌;于佳
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：毒理学的传统定义是研究外源性化学物质对生物体损害作用的学科.毒理学需要用实验动物来进行各种实验,通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用,获得毒物的毒性、剂量反应关系、毒作用机制等方面的资料,因此动物实验是毒理学中重要的手段之一,大鼠是毒理学研究和医学研究的重要模式生物,通过总结毒理学实验中有关大鼠实验的基本操作,熟练掌握大鼠的选择与编号、抓取、染毒方法和血液标本的采集等操作技巧.
22.两种培养基分离培养BALB/c小鼠原代神经细胞方法的比较
- 李丹;吕耀中;王微;陆思博;许云飞;郝一萌;段玉段;王冠男;呼晶
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:用两种培养基分别分离培养BALB/c小鼠原代神经细胞,寻求一种简单、廉价的神经细胞培养方法.方法:用胰酶消化法将小鼠脑组织制成单细胞悬液,分别采用含10％马血清的DMEM以及添加2％神经细胞生长剂B27的Neurobasal培养基分离培养BALB/c小鼠原代脑神经细胞,并对其进行形态学观察.结果:两种培养基均能成功培养小鼠原代神经细胞,但含10％马血清的DMEM培养基更节省成本,方便廉价.
23.GLP实验室条件下的动物福利
- 许云飞;吕耀中;李丹;陆思博;王微;汪岩;段玉;郝依萌;王冠男
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：随着GLP在我国的飞速发展,实验动物在GLP实验室中得到了广泛应用.作为动物实验的载体,实验动物的生存状态和福利状况直接影响到实验结果的准确性,因此在GLP实验室条件下对动物福利提出了更高的要求.本文从实验动物福利伦理审查、实验动物的日常饲养管理、实验过程中及实验结束后动物的护理和处理四个方面,浅析如何在GLP实验室中做好动物福利.
24.浅谈IVC系统的优势与维护保养
- WANG Xin-li;王欣丽;KONG Li-juan;孔丽娟;WANG cheng;王成;HAO Zhi-hui;郝智慧
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：随着生命科学和医药学科的快速发展,实验动物的地位也越来越受到科技界的重视,IVC系统在实验动物饲养中具有诸多优点,因此目前被广泛应用.结合高校SPF级动物实验室IVC系统使用的实际情况,论述了IVC系统的优势及设备维护与保养措施，IVC设备及各项指标的定期检查，滤膜的更换等。
25.一种用于动物实验通用固定支架的研制与应用
- YIN Huan;银欢;ZHAO Jian-wen;赵建文
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研制一种适用于动物实验的通用固定支架.方法:根据动物的体型大小,调节固定支架的颈部、腹部固定装置.结果:此固定支架可将动物固定,适合于给药、外科手术等实验操作.结论:此固定支架不仅定位准确,而且适合各类中小型实验动物的实验,通用性强.
26.医学院实验动物学课程建设的探讨
- 吴骁
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：高校医学生专业课学习后,不可避免使用实验动物做实验.如果没有接受过实验动物与动物实验相关知识技能的培训,将很可能出现各种问题,对动物和自身造成伤害.因此,建议在专业课之前开设实验动物学课程.由于本学科发展较晚，专业技术人员相对较少，对于从事实验动物学教学人员来说，还有许多需要努力，学习。也建议医学院应高度重视此学科的发展，提高改善学科的地位和教学质量，以适应医药学的发展趋势。
27.浅谈屏障系统动物饲养和实验屏障系统微生物控制
- 王希友;呼晶;王微;汪岩;车振源;于峰;林华唐
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：在微生物污染中致病微生物的污染会给生产和实验带来极大的危害。而动物的致病微生物污染是一个漫长的过程，要经过进人屏障，感染动物并在动物体内繁殖达到一定数量(潜伏期)后，引起动物的生理机能的障碍三个过程，大多数情况下是在三个过程之后才被发现或者检测出来，当饲养人员或检测人员发现问题的时候，可能已经是几周甚至几个月后。由于结果显现的滞后性，很容易使工作人员放松警惕，所以让工作人员充分意识到微生物污染的危害性，严格管理、持之以恒。人员和物品每次进人屏障系统都会给屏障系统内的微生物控制带来一定的风险，所以建议每天的工作先制定屏障内的工作计划，根据工作安排进人屏障内的人员，尽量减少进人屏障系统内的人次和物品，有助于屏障系统内的微生物控制工作。微生物控制是一项极其复杂而繁琐的工作，需要多环节的严格操作，妄想通过一步操作解决屏障系统内的微生物控制是不现实的。只有加强各个环节的控制，才能有效地控制微生物污染。只有通过工作人员坚持不懈、持之以恒地谨慎小心，严格操作，才能有效地控制屏障系统内的微生物，做好屏障系统内的微生物控制工作。
28.饲料湿度对经口饲喂慢性与致癌联合试验的影响
- 张宇;白楠;张建;唐凤洋;呼晶;郝依萌;于峰;权文超
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:在进行104周大鼠慢性与致癌联合试验当中,染毒饲料配制是整个试验最重要的环节之一,也是整个试验的开始阶段.在进行大鼠慢性与致癌联合试验(仅讨论通过染毒饲料饲喂给药途径的长期毒性试验)的过程中,饲料存在的各种问题也是影响染毒饲料的配制并对试验造成不良影响的因素之一.本文旨在分析慢性与致癌联合试验中染毒饲料的配制和使用过程中存在的各种问题,探讨可能对试验造成的影响以及解决办法.rn 方法:遵从中华人民共和国农业部于2003年12月1日发布并于2004年3月1日实施的NY/T718-2003《农药毒理学安全性评价良好实验室规范》的要求,按照试验方案安排,按照本机构标准操作规程《染毒饲料的配制和取用》配制染毒饲料.在配制、验证分析、染毒饲料添加等环节观察饲料湿度、细度对试验的影响.rn 结果:饲料的湿度大小和细度大小对染毒饲料的配制、染毒饲料的均一性、操作人员的安全都会产生影响.饲料的湿度大,饲料比较潮湿,经过真空密封后,产生部分硬结块,不利于供试品在饲料中的充分混合,均一性较差,难以满足饲料混配的均一性要求;饲料湿度低,饲料比较干燥,在染毒饲料配制及饲喂染毒饲料的环节产生漂浮粮,易发生交叉污染,同时可能会对操作人员的职业健康带来安全隐患.
29.美洲旱獭感染实验饲养管理及实验技术探讨
- XUE Kangning;薛康宁;LI Xiaoyan;李晓燕;ZHANG Heyuan;张贺源;LU Xuancheng;卢选成;LI Lili;李利利
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立美洲旱獭在动物生物安全二级(ABSL-2)负压动物饲养设施内进行感染实验的饲养管理及实验技术,为该动物在肝炎病毒的研究中提供服务平台.方法:从PubMed和万方数据库中搜集关于旱獭的饲养管理相关文献,结合实际工作经验,总结出关于美洲旱獭在ABSL-2负压动物饲养设施内进行感染实验的饲养管理及实验技术经验.结果:总结出一套适用于ABSL-2负压动物饲养设施内美洲旱獭感染实验的饲养管理及实验技术.结论:总结出的一套饲养管理及实验技术可应用在美洲旱獭在ABSL-2负压动物饲养设施内的感染实验.
30.始冻温度、解冻温度对于犬精液冷冻保存的研究
- 刘晋津
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：本实验在以往研究的基础上进一步研究了冷冻起始温度、解冻温度对犬精子活率的影响.实验结果表明:起始冻温度为-70℃时冻后精液质量最好,冻后精子活率达0.6284±0.0408,优于-65℃和-75℃时的冻后精子活率;解冻温度为70℃时对解冻后精液质量最好,达0.6810±0.0324,优于60℃和65℃的精子活率.
31.一种建立结直肠癌原位移植瘤动物模型的方法
- YANG Xi-hua;杨喜花;LI Yao-ping;李耀平;REN Lian-sheng;任连生;ZHAO Li-li;赵莉莉;YANG Yong-ming;杨永明;BAI Xi-hua;白喜花
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立一种制备结直肠癌原位移植瘤动物模型的方法.方法:制备一种建立小鼠结直肠癌原位移植瘤的装置,使用该装置于昆明小鼠结直肠原位接种1×106的H22肿瘤细胞,观察其成瘤情况及肿瘤转移情况.结果:将H22细胞接种于昆明小鼠结直肠部位,小鼠平均生存时间为16.5±4.5d.动物死亡后解剖后,观察到6只动物全部形成肿瘤,成瘤率为100％,个别动物有骼淋巴结转移,转移率为33.3％.结论:采用自制结直肠癌原位接种器可成功建立结直肠癌原位移植瘤动物模型,该方法具有操作简便,成瘤率高的优点.
32.应用Dicer转基因小鼠建立黑色素瘤模型的研究
- LI Zhao-yang;李兆阳;Jiang Chuan;姜川;YANG Wei;杨葳;DONG Wan-wei;董婉维;ZHENG Zhi-hong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:应用Dicer转基因小鼠建立黑色素瘤模型.方法:将小鼠黑色素瘤细胞株分别移植于Dicer转基因鼠和C57BL/ 6J小鼠前肢腋下,观察两种小鼠的荷瘤情况,包括移植瘤生长情况、移植瘤生长曲线.结果:与C57BL/ 6J小鼠组肿瘤比较,Dicer转基因小鼠组的肿瘤成瘤时间短、肿瘤生长速度快、肿瘤体积大(P＜0.05).结论:本研究应用Dicer转基因小鼠建立黑色素瘤模型,结果显示Dicer基因对黑色素瘤荷瘤有明显影响,为进一步研究Dicer在黑色素瘤发生和发展中的作用奠定了基础.
33.mTOR与ERK协同调控Hep3B细胞cyclin D1的表达
- CUI Hai-peng;崔海鹏;董建一;DONG Jian-yi;YAO Liang;姚亮;LI Hui-ling;李慧玲;CHEN Jun;陈军;WANG Fu-jin;王福金;王爱国;WANG Ai-guo;WANG Jing-yu;王靖宇
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨Hep3B细胞中调控cyclin D1过表达的分子机制.rn 方法:提取正常肝细胞LO2和肝癌细胞Hep3B的总RNA和蛋白,RT-qPCR和Western blot法检测cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平以及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK 1/2(p-ERK1/2)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、NF-κB抑制蛋白α亚基(IkBa)的蛋白表达水平.ERK、mTOR、NF-κB抑制剂处理Hep3B细胞,检测cyclin D1的mRNA和蛋白表达变化.rn 结果:与LO2相比,Hep3B中cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平分别升高115.73倍(t=36.617,P＜ 0.001)和22.60倍(t=8.457,P＜0.001),p-ERK1、ERK1、p-mTOR的蛋白表达水平分别升高10.87倍(t=5.903,P=0.004)、24.77倍(t=23.284,P=0.002)和20.60倍(t=24.492,P＜ 0.001),IκBα的蛋白表达水平没有显著差异(t=35.923,P=0.058).ERK抑制剂PD184352处理Hep3B细胞,对p-mTOR蛋白表达水平没有明显影响,但cyclin D1的mRNA表达水平显著下降(F=52.53,P＜ 0.001).其蛋白表达水平也随之在6-24h明显降低.mTOR抑制剂Rapamycin处理Hep3B细胞,明显提升了p-ERK蛋白的表达水平和显著升高了cyclinD1mRNA的表达水平(F=587.47,P=0.002),但cyclin D1的蛋白表达水平在6-24h明显降低.同时用ERK和mTOR的抑制剂处理Hep3B细胞,与ERK抑制剂的处理结果相同.NF-κB抑制剂BAY11-7082处理Hep3B细胞对cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平没有明显影响.rn 结论:ERK1和mTOR是调控Hep3B细胞cyclin D1表达主要信号分子.mTOR对ERK的抑制作用可能是维持适当cyclin D1蛋白水平的重要调控机制.
34.Wistar大鼠妊娠期Ⅱ型糖尿病模型研究
- 李诗月;吕耀中;于佳;林华唐
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:综述近年来Wistar大鼠妊娠期Ⅱ型糖尿病大鼠模型的研究进展及对其优缺点进行评价和未来同类模型的展望.方法:将孕鼠高脂高糖喂养四周,腹腔注射两次STZ(链脲佐菌素),两次间隔两天,两天后,出现多饮、多食、多排泄,体重减轻等症状,部分的血糖开始升高,7天后血糖大于16.65大鼠约80％.十天后血糖大于16.65大鼠约90％.结论:经过综合评价研究,目前Wistar大鼠妊娠期Ⅱ型糖尿病大鼠模型制作前景可观.
35.表达多基因转基因猪体细胞抑制流感病毒复制研究
- 孟庆文;臧凤霞;王伟;周长良;陈洪岩
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:获得具有抑制猪流感病毒复制能力的表达多基因转基因猪.rn 方法:在成功培育F0代表达shRNA-Mx-RNAi三基因转基因猪的基础上,经PCR、Southern blot、RT-PCR、Western blot 方法鉴定,筛选出阳性转基因猪,与野生型同品种猪(WT)进行杂交繁育F1代转基因猪.通过上述分子生物学方法分析阳性转基因猪.分离与培养1日龄F1代转基因猪体细胞,100TCID50A /Swine/Guangdong/2004(H1N1)毒株感染体细胞,通过间接免疫荧光(IFA)、实时荧光定量PCR(Real-time PCR)、病毒滴度测定分析了转基因猪体细胞抗流感病毒活性.rn 结果:3头F0代转基因猪均为阳性转基因猪,选择其中1头阳性转基因猪与野生型同种猪繁育获得5头F1代转基因猪,1头为阳性转基因猪.与非转基因猪和WT猪相比,阳性转基因猪体细胞具有抑制流感病毒复制活性,细胞感染流感病毒16h,细胞中H1N1 PB2基因复制效率比WT降低2倍,细胞上清中病毒TCID50达1×10-2.8.rn 结论:该表达shRNA-Mx-RNAi三基因转基因猪体细胞在体外具有抑制流感病毒复制活性,为进一步在体内评价转基因猪抑制猪流感病毒病毒活性奠定了基础.
36.实验动物专业教育和培训的思考
- Lu jing;卢静;Chen Baian;陈柏安;Sun quan;孙泉;Meng xia;孟霞
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：本文介绍了生物医药产业是中国未来国家发展战略的核心力量之一,人才是生物医药产业发展的重要资源.实验动物专业人才是生物医药发展中人才资源的重要组成.实验动物专业教育和培训将为生物医药发展提供人力资源储备.因此认识实验动物专业教育和培训的重要性具有战略意义.
37.褪黑素对家兔肾上腺素所致肺水肿的保护机制初探
- WU Xiao;吴骁;YANG Xiaolong;杨小龙;WANG Dan;王丹
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨褪黑素对家兔肾上腺素实验性肺水肿的作用.方法:家兔随机分成正常对照组、肾上腺素组和褪黑素组,褪黑素组则给予褪黑素10mg/kg进行治疗,30min后肾上腺素实验组和褪黑素治疗组给予肾上腺素1mg/只复制肺水肿模型,对照组分别给予等量生理盐水作对照.观察记录不同时间点呼吸频率的变化,比较肺体系数及肺的病理组织学检查.结果:肾上腺素注射后,呼吸急促并维持一段时间,呼吸变慢变浅;褪黑素治疗组与实验组比较明显减慢呼吸频率且降低肺体系数.病理组织学检查发现肺泡壁断裂,肺泡隔明显增宽;褪黑素明显减轻上述的症状.结论:褪黑素对肾上腺素所致肺水肿具有保护作用.
38.芹菜山楂汁对小鼠血压、血脂、脂肪肝形成影响
- Lang Xue-Nan;郎雪楠;Guo Xiao-chong;郭晓冲;Chen Xue-ting;陈雪婷;Li zhao-yang;李兆阳;Dong Wan-wei;董婉维;Zhou Sheng-lai;周生来
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨芹菜山楂混合提取液对小鼠血压、血脂以及脂肪肝形成的影响.方法: 30只3周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、高脂组和芹菜山楂汁灌胃组.定期称重,观察饮水量,进食量.饲养8周后进行血压、血脂、肝组织病理学检测.结果:高脂饮食组小鼠血压、血清TC、TG、LDL-C较对照组均有明显的升高,且部分小鼠出现轻度脂肪肝(P＜0.05).灌胃组血压、血脂、脂肪肝各项指标较对照组有所升高,但低于高脂组,且几乎没有发生肝脂肪变性(P＜0.05).结论:芹菜山楂汁有降血脂、降血压和预防脂肪肝的作用.
39.eNOS基因敲除大鼠模型的建立及表型初步研究
- YANG Wei;杨葳;周生来;ZHOU Sheng-lai;DONG Wan-wei;董婉维;WANG Wei;王惟;YU Yang;于洋;GUO Xiao-chong;郭晓冲;ZHANG E-nuo;张婀娜;郑志红;ZHENG Zhi-hong;WANG Hong-yu;王宏宇
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立eNOS基因敲除大鼠模型.rn 方法:利用锌指酶技术,通过显微注射的方法将RNA注入SD大鼠受精卵并移植到同期受孕的SD受体母鼠输卵管内.出生后仔鼠用PCR产物测序的方法鉴定基因型.对敲除大鼠进行外观观察,HE染色分析组织结构形态.通过Western-blot分析敲除大鼠模型的心脏和肾脏组织中eNOS的表达情况.测量8-16周大鼠体重,分析eNOS基因敲除对体重的影响.采用尾套法测量大鼠心率、血压、收缩压和舒张压,比较与野生型大鼠的差异.rn 结果:通过显微注射方法共注441枚受精卵,存活365枚,分别移入12只SD大鼠输卵管,共产出23只F0代大鼠.PCR产物测序分析获得4只阳性原代大鼠,对8号大鼠筛选获得纯合子.阳性纯合子大鼠表现为肢体缺损,HE染色动脉血管结构形态异常.Western-blot结果显示,eNOS敲除大鼠的心脏和肾脏组织中不表达eNOS基因.敲除大鼠的体重明显低于野生型大鼠,体重增长幅度慢.血压、收缩压、舒张压均高于野生型SD大鼠,有极显著差异(P＜0.01).eNOS敲除雌鼠心率低于野生型SD雌鼠,有显著差异(P＜0.05).eNOS敲除雄鼠心率与野生型SD雄鼠相比无差异.rn 结论:成功建立eNOS基因敲除大鼠模型,该模型是高血压疾病研究理想的动物模型.
40.浅谈高校IVC动物实验室的管理制度
- KONG Li-juan;孔丽娟;WANG Xin-li;王欣丽;WANG cheng;王成;HAO Zhi-hui;郝智慧
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：针对目前高校动物实验室的特点和管理现状以及所面临的问题,结合本校IVC动物实验室的管理经验,在实验室现存的硬件条件下,从制度上加强管理,提高实验室的利用率,减少因人员带来的环境污染机会.从而更好的发挥高校公共实验室平台的作用.
41.SD大鼠热应激模型的制作及评价
- Fei Dongliang;费东亮;Ba caifeng;巴彩凤
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:热应激SD大鼠模型的制作及生理生化指标的检测.rn 方法:将20只SD大鼠随机分成2组,1组为对照组,2组为模型组.其中模型组在霉菌培养箱内以高温40℃、50％相对湿度热攻击2h,使热应激发生,对照组正常饲养,2h后观察大鼠行为变化,死亡个体剖检,眼底静脉丛采血,检测各种理化指标.rn 结果:与对照组相比,模型组的pH值升高,差异不显著(P＜0.05),Na+、K+浓度降低,其中K+达到差异极显著(P ＜0.01);血浆蛋白TP、ALB、HB浓度下降,达到差异极显著(P＜0.01);血清酶ALT、GOT、ALP、LDH、CK活性均表现为升高,达到差异显著或极显著(P＜0.0或P＜0.01);SOD浓度降低,差异极显著(P＜0.01),MDA浓度升高,差异极显著(P＜0.01).rn 结论:模型组符合热应激指征,SD大鼠热应激模型制作成功.
42.控制KM小鼠带仔数量对仔鼠状态以及母鼠生产性能的影响
- YANG Jan-li;杨健莉;WANG Meng;王猛;GAO Jian;高健;FANG Lei;房磊;YANG Chen;杨晨;ZHENG Zhi-hong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研究控制KM小鼠带仔数量对仔鼠状态以及母鼠生产性能的影响.方法:选取6周龄KM小鼠70对,随机分为2组,每组35对,按雌雄1:1交配,实验组对母鼠带仔数量进行控制,保证每胎带仔8只,21d离乳.对照组,雌鼠哺乳全部生产的仔鼠,21d离乳,比较1-3胎两组仔鼠的出生体重,离乳体重,产仔数,离乳率以及胎间隔,观测其对小鼠生长发育和繁殖性能的影响.结果:实验组与对照组相比较,出生体重,离乳体重,离乳存活率,胎间隔均存在差异(P＜0.05),比较具有统计学意义.结论:对仔鼠数量进行控制在一定程度上会提高子代的成活率、子鼠的状态以及母鼠的生产性能.
43.甲状腺激素抑制Ras癌基因诱导的肝肿瘤发展
- Zhang Min;张敏;Dong Jian-yi;董建一;Li Hui-ling;李慧玲;Nie Xin;聂鑫;WANG Fu-jin;王福金;WANG Ai-guo;王爱国;WANG Jing-yu;王靖宇
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨甲状腺激素对Ras癌基因诱导小鼠肝肿瘤发生发展的影响作用.rn 方法:采集3、5、7、9月龄非转基因小鼠和H-ras12V转基因小鼠的肝组织和血清样本,统计肝/体质量比,酶联免疫法检测血清中T3、T4水平.RT-qPCR法检测组织中甲状腺激素结合蛋白(TBG)的mRNA表达水平.甲状腺片(甲亢组)和甲硫咪唑(甲减组)喂药3月龄的转基因小鼠,至小鼠7月龄采样,统计小鼠肝/体质量比、肝肿瘤大小及数量.rn 结果:与同月龄非转基因小鼠相比,3、5、7、9月龄的转基因小鼠肝/体质量比显著升高,P＜0.01.血清检测结果表明,与同月龄非转基因小鼠的T3(99.80±25.03)和T4(1.03±0.90)相比,9月龄转基因小鼠血清T3(217.43±47.47)和T4(3.20±1.53)水平显著升高,T3:t=-5.632,P＜0.001;T4: t=-3.170,P=0.006.RT-qPCR检测结果表明,与同月龄非转基因雄鼠肝组织及肿瘤周围组织相比,9月龄转基因雄鼠肝肿瘤组织中TBG的mRNA表达水平显著升高,P＜0.01.甲状腺片(甲亢组)和甲硫咪唑(甲减组)处理实验结果显示,与甲减组相比,甲亢组的肝/体质量比显著下降,t=3.084,P=0.005.与甲减组肝肿瘤总数(13.58±6.33)相比,甲亢组(7.33±4.66)显著下降,t=2.755,P=0.012.直径在2-5mm之间的肿瘤数量统计结果表明,与未处理组(5.09±3.88)相比,甲亢组(2.75±1.71)显著下降,t=2.279,P=0.033;与甲减组(6.08±3.85)相比,甲亢组也显著降低,t=2.741,P=0.012.直径在5-10mm之间的肿瘤数量统计结果表明,与未处理组(2.50±2.42)相比,甲亢组(0.75±0.87)显著下降,t=2.279,P=0.033;与甲减组(2.58±2.78)相比,甲亢组也显著下降,t=2.182,P=0.040.rn 结论:甲状腺激素对Ras癌基因诱导的肝肿瘤发展具有显著的抑制作用.TBG表达升高可能是诱导转基因小鼠的高甲状腺素血症的重要因素.
44.磁小体介导制备转基因猪动物模型的研究
- CHEN Ke-yan;陈克研;DONG Wan-wei;董婉维;ZHENG Zhi-hong;郑志红;CHEN Zhen-wen;陈振文
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:以磁小体(BMP)和聚乙烯亚胺(PEI)为载体,通过睾丸注射精子介导法建立转基因猪动物模型.rn 方法:将实验室保存的LpPL A2-GFP质粒与BMP和PEI混匀,制备BMP-PEI-PLA2-GFP混合物,采用睾丸多点注射法接种巴马小型猪;而后不同时间采集精液,分别用RT-PCR和免疫荧光鉴定外源基因的表达情况;取阳性精液,对母猪实施人工授精,PCR及Real-time PCR对所产仔猪进行鉴定.rn 结果:精液中GFP基因于第4周首现并持续至第16周;荧光镜检可观察到GFP蛋白主要表达于精子顶体后区及精子尾颈部;经人工授精所产21头仔猪中,有9头猪PCR及Real-time PCR检测阳性,总阳性率达42.86％.rn 结论:BMP和PEI结合可作为良好的携带外源基因的非病毒性载体,用该载体通过精子介导法可以达到迅速制备转基因猪的目的,其成本低、方法简单、便捷.
45.自噬与帕金森疾病相关性的研究进展
- 李媛;张梅英
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)是一种常见的神经退行性疾病,严重影响老年人生活质量,目前其发病机制尚不明确,环境和遗传等因素均与其发病机制密切相关.越来越多的研究表明,线粒体功能异常和自噬损伤可能是导致PD发病的关键分子机制之一,因此,利用细胞模型及PD动物模型研究自噬对帕金森发病机制的作用具有重要意义.本文就线粒体自噬与帕金森疾病相关性的研究进展做简要的介绍，通过对PD小鼠模型以及细胞水平线粒体自噬的研究发现，线粒体自噬在PD发病机制中具有重要作用，维持线粒体功能稳定或促进受损线粒体降解将有助于保护多巴胺能神经元。线粒体缺陷与PD发病之间的实验数据显示，自噬调控可能为治疗PD疾病某些类型的一种新手段。然而，研究者普遍认为自噬是一把双刃剑，因为无论自噬降低或增强都绝对是有害而无益的，因此，单纯增强自噬并不可行，诱导细胞自噬的药物使用也必须谨而慎之。综上所述，通过构建PD小鼠模型并进行线粒体自噬深入研究，阐述线粒体自噬在PD发病中的作用机制，将为人类PD疾病发病机制与临床治疗提供更多参考资料。
46.药物毒理学及其实验动物替代的研究进展
- 汪岩;牛志刚;王昂;陆思博;许云飞;王希友;张宇
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：随着新化学物质的日益增多以及"3R"原则的广泛重视和实施,传统的毒性试验面临着严峻挑战.毒性试验的发展正经历着一个关键时期,即从耗时、耗费的传统整体动物试验转向快速高通量的、含定量参数分析和机制研究的体外替代试验.实验动物替代方法不仅是出于遵守"3R"原则,也是毒理学学科发展以及社会经济发展的需要与科学要求.实验动物替代方法的发展与应用已成为21世纪毒性测试的重要方向,获得越来越广泛的支持和管理认可,具有广阔的发展前景和十分重要的应用价值.
47.应用IVC进行免疫缺陷小鼠饲养的初探
- Wang Cheng;王成;Kong Li-juan;孔丽娟;Wang Xin-li;王欣丽;Hao Zhi-hui;郝智慧
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨应用IVC进行免疫缺陷小鼠的饲养.方法:通过在洁净工作台内无菌操作以及对实验室内免疫缺陷小鼠接触物品的严格消毒.结果:IVC内环境适宜,免疫缺陷小鼠生长良好.结论:应用IVC进行饲养,可以有效的满足免疫缺陷小鼠的日常需要,避免了不同笼之间的交叉感染.
48.左卡尼汀注射液热源检查替代方法的探讨
- 张春艳;金红雨;赵妍;于峰
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立左卡尼汀注射液细菌内毒素检查方法,替代家兔法检查热源,缩短检验周期,减少动物使用,满足3R原则.方法:根据左卡尼汀注射液临床应用剂量,参考USP标准,设定细菌内毒素限值L＜0.1EU/mg.随机抽取10批次供试品分别用家兔法和细菌内毒素法进行实验,然后将检验结果进行对比.结果:10个批次的供试品进行热源检查时,每试验组的3只家兔单只体温变化均低于0.6℃,三只家兔升温总和均低于1.3℃.相同批次供试品进行细菌内毒素检查时,每批次实验结果内毒素限值均小于0.1EU/mg.结论:左卡尼汀注射液应用细菌内毒素检查法替代家兔法检查热源具有可行性.
49.盐酸多培沙明注射液局部安全性试验研究
- 王丽娜;周晓琳;王秀英
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:评价盐酸多培沙明注射液的安全性,为临床用药提供实验依据.rn 方法:家兔耳缘静脉给予盐酸多培沙明注射液9mg·kg-1,每天给药1次,连续给药5d,停药96h后对注射部位进行病理组织学检查;家兔股四头肌给予1mg·mL-1盐酸多培沙明注射液1ml,给药1次,48h后对注射部位进行病理组织学检查;豚鼠隔日腹腔注射盐酸多培沙明注射液0.5mL,连续注射3次,分别于末次致敏后第14天静脉注射10mg· ml-1盐酸多培沙明注射液1.0mL进行激发,观察豚鼠30min内是否出现过敏反应;4mg· ml-1盐酸多培沙明注射液0.1～0.5mL在4.5～4.9mL兔红细胞混悬液中放置3h,观察对兔红细胞悬液的溶血及有无红细胞凝聚作用。rn 结果:盐酸多培沙明注射液无明显血管刺激性;无明显肌肉刺激性;无溶血和凝集反应;豚鼠全身主动过敏性试验为阴性.rn 结论：在本次实验条件下,盐酸多培沙明注射液符合注射剂安全要求.
50.银杏内酯注射液对SD大鼠的胚胎-胎仔发育毒性试验研究
- 吕耀中;王智琴;于峰;张心;段玉;李诗月;白楠;张建;许云飞;修世福
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:检测银杏内酯注射液对妊娠大鼠是否有母体毒性,胚胎毒性以及致畸毒性.rn 方法:本试验按照《药物生殖毒性研究技术指导原则》(2006年12月)的规定进行.参考本品急性毒性、长期毒性及临床用法用量,设计低、中、高3个剂量组(20mg/kg、40mg/kg、80mg/kg,相当于人临床日用体重等效量的28倍、56倍、112倍),同时设1个生理盐水对照组和1个辅料组.对妊娠大鼠在妊娠第6天至第15天尾静脉给药(受孕当天为妊娠第0天),每天给药一次.于动物妊娠第20天脱颈椎处死后,立即剖腹取出子宫并称量子宫连胎重(即子宫、胎鼠和胎盘的总重量),记录黄体数、活胎数、死胎数和吸收胎数;检查活胎性别,观察其外观畸形;测量胎鼠的身长、尾长、体重和胎盘总重量.胎鼠经相应处理后进行内脏和骨骼检查.并对各项检测指标进行统计学处理.rn 结果:在本试验条件下,经尾静脉给药银杏内酯注射液20mg/培、40mg/kg、80mg/kg时,对妊娠大鼠无母体毒性,对妊娠大鼠的生殖力无影响,对胎鼠的生长发育无影响,也无致畸作用.rn 结论:银杏内酯注射液对妊娠大鼠是无母体毒性,胚胎毒性以及致畸毒性.
51.炎症性肠病动物模型的研究进展
- 许云飞;陆思博;李丹;王微;汪段玉;郝依萌;吕耀中;于佳
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：炎症性肠病(IBD)是一种发生在胃肠道的慢性自身免疫性疾病.虽有研究显示环境和遗传因素在IBD的发病机制中发挥作用,但其确切病因尚不清楚.IBD动物模型的出现为人们详细的了解慢性黏膜炎症反应中的免疫过程提供了可能.本文就近几年发现的、与研究人类IBD相关的动物模型做一综述，尽管动物模型的使用极大的丰富了对人们对IBD的认识和研究(如肠道菌群和细胞因子等)，但只有将动物模型与人类体外研究相结合，才能有助于人们更加深入地了解IBD的病因、发病机制，探讨其潜在的治疗手段，从而最终有效控制IBD。
52.一氧化氮对动物胚胎附植影响的研究
- 魏东;孙全文
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：一氧化氮(NO)作为一种特殊的生物传递信号分子,日益受到生命科学各领域的普遍重视.机体内的NO是由三种一氧化氮合酶合成的,是哺乳动物体内发挥多种生物学效应的自由基,是一种重要的生物信使,它几乎对哺乳动物的所有系统都会产生一定的作用.近几年的研究结果表明,NO对动物胚胎附植发挥着促进、抑制等重要作用.虽然NO不是调节胚胎附植过程的唯一介导者，还有许多NO之外的机制参与，但作为一种重要的信使分子，NO从胚胎发育和影响子宫环境两方面参与胚胎附植，NO的浓度对不同阶段的胚胎发育状态有不同影响，用适当的方式增加NO/NOS，对调节发育有重要的影响，这将为调控畜禽繁殖技术的深人研究提供良好的理论基础。
53.山楂叶总黄酮对实验性心肌梗死犬的保护作用
- 张大维;徐彩云;孙剑锋;张逸鹤;杨世杰;许艳茹;石菊;宫余静;曲芯瑶
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研究山楂叶总黄酮注射给药对犬实验性心肌梗死的保护作用.rn 方法:犬麻醉后结扎冠状动脉前降支造成急性心肌梗死模型.随机分为假手术组、模型组、复方丹参注射液组、山楂叶总黄酮大、中、小剂量组,记录心外膜电图,检测血清中谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)活性,计算心肌缺血程度(∑ST)及心肌梗死范围(MIS).rn 结果:山楂叶总黄酮大、中剂量组不同程度降低∑ST变化,缩小MIS,还可降低血清AST、LDH、CPK、MDA的含量,提高SOD活力,与模型组比较,差异具有统计学意义.rn 结论:山楂叶总黄酮对犬急性心肌梗死有较好的保护作用.
54.等离子体对裸鼠荷人源黑色素瘤的抑制作用观察
- 蒋立群;李志满;吴建军
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:测试等离子体(APNP)对恶性黑色素瘤的抑制效果.方法:建立B16恶性黑色素瘤的裸鼠移植模型12只,,随机分为等离子体治疗组和空白对照组.定期测量肿瘤的长径和短径并观察动物的健康状态,计算肿瘤体积和抑瘤率.结果:治疗组的肿瘤抑制率88％.结论:适量的等离子体具有有效抑制恶性黑色素瘤的生长的能力.
55.高效氯氰菊酯对小鼠肝脏的急性氧化损伤作用
- 袁从文;宋祥福;刘艳冬;李铁骥;张彦伟
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研究高效氯氰菊酯(β-CP)对小鼠肝脏的急性氧化损伤作用.rn 方法:将40只雄性ICR小鼠随机分为4组,包括:对照组(玉米油)、β-CP(10mg/κg)、β-CP(20mg/kg)、β-CP(40mg/kg)染毒组,连续灌胃染毒10d,观察小鼠精神状态、行为活动与摄食情况,测量小鼠体重及肝脏脏器系数,测定肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量.rn 结果:与对照组比较,各β-CP染毒组SOD活力有所降低,MDA含量有所升高,差异均有统计学意义(P＜0.01);各β-CP染毒组间比较,β-CP(40mg/kg)染毒组的SOD活力相对较低,MDA含量相对较高.rn 结论:β-CP能引起小鼠肝脏的急性氧化损伤,且40mg/κg剂量的β-CP氧化损伤作用较为明显.
56.GLP准则在空调空运行管理中的应用
- 王冠男;汪岩;于峰;权文超;郝依萌;王微;段玉;车振源
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：非临床健康和环境安全试验是评价化学品危害性的基础,遵守GLP准则是保证安全评价工作的科学性、公正性的基本保证,因此在实验动物设施体系中央空调系统,坚持遵守GLP准则,是动物实验的基本前提和保障，要确立空调管理负责人职责，保障空调系统设备的启动运行，分析了空调系统设备停机管理，对空调系统设备进行巡视检查及维护，分析了其故障处理及记录。
57.动物福利法的理论基础和基本原则
- 段玉;汪岩;权文超;郝依萌;王微;王冠男;车振源
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：随着社会经济的发展,人们保护动物的意识日益普及.但近年来,各种虐待动物事件不断被曝光,引发了人们对"动物福利"的关注,有关动物福利立法的呼声也日益高涨,但由于社会认知水平与现实利益等方面的原因,我国相关立法进程缓慢.2005年8月,畜牧法草案中有关"动物福利"条款的流产,预示着我国在这方面的立法已见曙光,还有很长的路子要走.当前,立法保护动物福利已经成为国际总体趋势,在此情形下,如何顺应潮流建立符合我国国情的动物福利立法体系,以适应社会发展的需要,显得尤为迫切.而加深动物福利立法方面研究,对推动我国相关立法步伐意义重大.本文从动物福利的概念和伦理基础着手,对动物福利立法的产生原因和发展过程做了介绍,在分析现有条件下我国动物福利立法的必要性和可行性基础上,对如何构建符合我国国情的动物福利法体系做了深入探讨.
58.浅析实验室内动物模型制作中实验动物的选择
- 王健;王春田
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：一个理想的实验动物模型,应具备相似性、重复性好,考虑到易行性和经济性等多方面.其自然发展过程近似人类疾病且具有同样的治疗反应特点,选择合适的实验动物对模型制作和实验最终成功起到事半功倍的作用.
59.GLP实验室病理技术的质量控制
- NIU Zhi-gang;牛志刚;WANG Zhi-qin;王智琴;LU Yao-zhong;吕耀中;WANG Ang;王昂;YU Feng;于峰
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：由于病理切片标本的制作质量关系到病理诊断的准确性,高质量的切片标本是保证科学实验准确性的关键因素之一.本文主要探讨如何正确的制作病理切片标本及如何建立符合GLP规范的病理技术实验室，将制片的全过程归纳到一个系统中去分析，并研究出片前制片流程中所有影响质量的要素，从而进行整体优化，并处理好各项质量环节的协调和配合，进而获得规范的工作流程。落实标准操作规程，使全面质量控制措施从源头上开始执行，从根本上解决了病理标本处理前告知义务不落实、标本取材质量差、工作流程效革低下、各环节责任不明晰、差错或隐性差错因素多等弊端，保证了制片质量，提高了工作效率，杜绝了差错事故的发生，为高质量的临床病理诊断提供了强有力地保障。
60.GLP体系下屏障系统的管理
- 陆思博;吕耀中;王可宇;王微;邰婷婷;孙晓光;于峰
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:是提高试验数据的质量和正确性,以便确定化学品和化学产品的安全性.严格控制化学品安全性评价试验的各个环节,即严格控制可能影响实验结果准确性的各种主客观因素,降低试验误差,确保实验结果的真实性、完整性和可靠性.方法:实验室试验的计划、实施、审查、监控、记录、归档和报告等的组织过程及条件要求.结论:试验机构在为国家管理部门提供数据而进行的化学品评价和其他与人类健康及环境保护有关的产品的试验过程中必须遵循GLP的准则.
61.国内外实验动物微生物检测的比较
- YANG Jan-li;杨健莉;WANG Meng;王猛;GAO Jian;高健;FANG Lei;房磊;YANG Chen;杨晨;SHI Xiao-ping;史晓萍
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：随着科技的进步,实验动物的应用越来越广泛,通过对实验动物进行微生物等方面的检测来确保实验动物的质量就显得尤为重要.本文以小鼠为检测对象,主要从微生物检测方面向大家介绍了美国Jackson laboratory和Charles river laboratory两家的动物检测报告,并与我国国标进行比较,比较内容包括检测项目、检测方法以及检测频率,结合我国微生物检测国标中要求的检测项目及实际检测情况,对一些相关关注的问题提出建议.
62.一种新型犬固定器的研制与应用
- ZHAO Jian-wen;赵建文;YIN Huan;银欢;WU Qi;吴琪;ZHANG Chun-yan;张春艳;WANG Guang-li;王广利
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研制一种新型犬固定器.方法:根据不同大小犬种设定不同挡位,将犬沿收紧式通道拽入外护架内.结果:随着犬进入外护架内,身体自动被周围围挡固定,使其全身受困,不能挣脱和咬人,便于人员对其安全操作.结论:经过反复调试和长期应用,实践证明此装置不失为一种新型的犬固定器,安全实用,操作方便,可进一步推广至教学科研实验与宠物医院等单位中规模化使用.
63.Beagle犬消声研究简报
- 李兰芳;郝智慧
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：作者以喉返神经损伤导致发声功能障碍为理论基础，提出了将切断喉返神经应用到实验动物消声的设想，并开展了相关实证研究，在作者的初步探究中观察到切断喉返神经在Beagle犬消声方面效果较好，迄今6个月内没有出现声音恢复的情况，但2只模型组动物出现了轻度间歇式呼吸困难。因此作者将对切断喉返神经在其他动物消声方面的应用，以及对其他功能的影响和解决方案进行更深入系统的研究。
64.两种提取大/小鼠组织DNA提取方法的比较
- Chen Xue-ting;陈雪婷;郎雪楠;Lang Xue-Nan;Li zhao-yang;李兆阳;zhang e-nuo;张婀娜;zhao wen;赵文;Dong Wan-wei;董婉维;Zhou Sheng-lai;周生来;张梅英;zhang mei-ying;zhegn zhi-hong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:获取质量稳定的基因组DNA,提高模型动物的快速基因鉴定速度.方法:以鼠尾为实验材料,采用苯酚/氯仿法和改良煮沸法提取鼠基因组DNA;分别用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量,采用PCR实验检测两种方法获得DNA的扩增效果.结果:酚/氯仿提取法提取的基因组DNA质量优于改良煮沸法,但两种方法获得的DNA模板均能成功应用PCR扩增进行基因型鉴定,且改良煮沸法DNA提取具有无毒、简单、高效、便捷的优点.结论:大批量转基因大/小鼠基因型鉴定可以优先选择改良煮沸法提取基因组DNA.
65.嗜血杆菌属CODEHOP PCR检测方法的建立及在树鼩检测中的应用
- XING Jin;邢进;FENG Yu-fang;冯育芳;YUE Bing-fei;岳秉飞;HE Zheng-ming;贺争鸣;DAI Jie-jie;代解杰
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:建立树鼩中嗜血杆菌的CODEHOP PCR快速检测方法,为树鼩微生物质量控制提供参考.rn 方法:应用CODEHOP在线简并引物设计工具,比对NCBI中6株嗜血杆菌的外膜蛋白序列设计简并引物.通过4株嗜血杆菌标准菌株和24株它属菌株进行特异性和敏感性评价,将建立CODEHOP PCR检测方法,应用于树鼩嗜血杆菌的检测.rn 结果:简并引物HF-1/HR-8和HF-3/HR3扩增标准菌株副鸡嗜血杆菌(ATCC 29545)、溶血嗜血杆菌(ATCC 33390)、流感嗜血杆菌(ATCC 33391)、副流感嗜血杆菌(ATCC 33392)的目的片段分别为506bp～535bp和344bp～390bp,经测序和NCBI Blast比对,结果准确.两对引物组合,能够有效的区分嗜血杆菌属菌株与它属菌株,检测限最低可达2.1pg/uL.在受试的野生树鼩呼吸道样本中嗜血杆菌阳性率为20/60.rn 结论:所建立的方法具有较好的特异性和敏感性,操作简便,能够用于动物样品的嗜血杆菌检测.
66.实验动物福利及IVC系统对实验动物福利的优势体现
- 吴腾;刘晋津
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：随着生命科学和医学研究工作的不断发展,实验动物在科学研究中的地位越来越受到重视.本文意在探讨实验动物的福利及其国内外的现状,并比较普通层流架、屏障系统和IVC(独立通气笼盒)系统,综合体现IVC系统在实验动物室建设及饲养过程中对于动物福利提高有其独特的优势.
67.金黄地鼠Apoa5基因表达载体的构建及在不同组织中的差异表达分析
- DONG Wan-wei;董婉维;张婀娜;ZHANG A-nuo;郭晓冲;GUO Xiao-chong;WEI Zheng-li;魏政立;YANG Wei;杨葳;ZHOU Sheng-lai;周生来;赵文;ZHAO Wen;ZHENG Zhi-hong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:构建金黄地鼠Apoa5基因表达载体以及在不同组织中的表达差异分析,为深入研究Apea5基因在金黄地鼠不同组织中功能奠定基础.rn 方法:提取金黄地鼠肝脏组织总RNA,采用RT-PCR方法对金黄地鼠4poa5基因的cDNA进行克隆,构建Apoa5基因表达载体并将其转染293T细胞,分别采用RT-PCR和Western blot方法检测mRNA及蛋白质表达水平.采用荧光定量PCR检测并分析Apoa5mRNA在8个组织中的表达量.rn 结果:经PCR检测鉴定,Apoa5基因表达载体构建成功,经测序分析金黄地鼠4poa5基因cDNA全长1243bp,编码366个氨基酸,与人、大鼠、小鼠等物种比对,核苷酸和氨基酸序列均具有较高的同源性,金黄地鼠与人、大鼠、小鼠的氨基酸同源性分别为75％、84％、84％.;转染293T细胞48h后,RT-PCR和Western blot结果表明Apoa5基因在mRNA和蛋白质水平都有表达.荧光定量PCR结果显示,Apoa5mRNA在肝脏表达量最高,在脑和睾丸中中度表达,在心、脾脏、肺、肾、卵巢组织中低度表达.rn 结论:成功构建Apoa5基因表达载体并分析其在不同组织中的表达差异,为制备Apoa5转基因金黄地鼠动物模型以及研究Apoa5基因在金黄地鼠脂类代谢中的功能奠定基础.
68.注射用心肌肽降压反应的实验研究
- 姜素云;矫建
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:研究注射速度对注射用心肌肽和组胺对照品引起猫降压反应的影响.rn 方法:按照《中国药典》现行版附录(ⅪG)的方法,分别将组胺对照品和注射用心肌肽,以不同的给药剂量和不同的注射速度给健康麻醉猫静脉注射,记录血压变化情况.rn 结果:1.静脉注射组胺对照品0.1μg/ml/kg、0.5μg/ml/kg、1μg/ml/kg、5μg/ml/kg和10μg/ml/kg,血压降低2.67kPa时的注射速度分别为26.50ml/min(2.65μg/min)、6.68ml/min(3.34μg/min)、2.64ml/min(2.64μg/min)、1.16ml/min(5.80μg/min)和0.27nl/min(2.70μg/min).2.静脉给予注射用心肌肽0.1mg/ml/kg,注射速度在2.5ml/min-40ml/min(0.25mg/min-4.0mg/min)范围内,均不产生降压反应;静脉给予注射用心肌肽0.3mg/ml/kg、0.6mg/ml/kg、1.2mg/ml/kg和3.0mg/ml/kg,血压降低2.67kPa时的注射速度分别为36.37-55.75ml/min(10.91-16.72mg/min)、21.43-25.13ml/min(12.86-15.08mg/min)、8.38-9.05ml/min(10.06-10.86mg/min)和2.14-4.53ml/min(6.42-13.59mg/min).rn 结论:组胺引起猫的降压作用,不仅与剂量有关,也与注射速度有关.
69.应用Talen法制备apoE基因敲除大鼠模型
- XU Ying-qi;徐影琪;YANG Wei;杨葳;ZHOU Sheng-lai;周生来;YU Yang;于洋;WANG Wei;王惟;ZHANG Mei-ying;张梅英;ZHENG Zhi-hong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:应用Talen法制备apoE基因敲除大鼠模型,为进一步研究apoE基因功能,动脉粥样硬化疾病发病机制及治疗方法奠定基础.rn 方法:设计并合成针对大鼠apoE基因的Talen序列,应用原核显微注射方法制备子代鼠.通过PCR-测序及TA克隆-测序法检测仔鼠中apoE的突变,经传代及兄妹交配获得纯合型仔鼠,并对基因型进行鉴定.应用western blot方法检测apoE-/-仔鼠ApoE蛋白表达水平;血清学分析血脂总胆固醇及甘油三酯含量;应用RT-PCR方法检测脂质代谢相关基因ATP结合盒转运体A1(ABCA1)的表达.rn 结果:经鉴定选取在第二外显子处缺失1bp,造成开放阅读框移码突变的大鼠为阳性F0代仔鼠,该鼠经传代获得子代鼠,并进行纯合子筛选,最终获得apoE-/-大鼠.Westernblot检测显示apoE-/-鼠在心、肝、肾、脑、卵巢组织中未见ApoE蛋白的表达,表明在该模型中成功实现了apoE基因的敲除.apoE-/-鼠血脂总胆固醇、甘油三酯均高于野生SD大鼠,其中总胆固醇水平呈现显著性差异(P＜0.05).在apoE-/-鼠肝组织中ABCA1的表达降低,可能起到促进AS形成的作用.rn 结论:应用Talen法成功制备apoE基因敲除SD大鼠;经筛选获得了纯合型apoE-/-大鼠,该模型实现了apoE基因敲除,并表现为高血脂及动脉粥样硬化状.
70.ADAR1在Hela细胞中通过抑制内源性凋亡途径促细胞存活
- YU Meng;于萌;李兆阳;LI Zhaoyang;DONG Wanwei;董婉维;WEI Zhengli;魏政立;XU Yingqi;徐影琪;CHEN Xueting;陈雪婷;LANG Xuenan;郎雪楠;张梅英;ZHANG Meiying;ZHENG Zhihong;郑志红
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:ADAR1作为RNA编辑酶,能够让双链RNA上的腺苷酸(A)转变为次黄嘌呤(Ⅰ).有研究证实ADAR1在肿瘤组织中表达较正常组织高,而且在造血过程中能够阻止细胞凋亡,这些都提示了ADAR1与人类肿瘤的形成有关.本研究在人宫颈癌细胞系Hela细胞中证明ADAR1通过抑制内源性凋亡途径促细胞存活.rn 方法:本研究利用脂质体转染将ADAR1(Human)shRNA干扰载体瞬时转入Hela细胞中,以shRNA空载体作为对照,在给予化疗药阿霉素(Adramycin,ADR)刺激不同时间点后,提取实验组及对照组Hela细胞的总RNA及细胞总蛋白裂解液,利用RT-PCR、WestemBlot等分子生物学方法进行凋亡相关基因Bcl2及Akt表达的检测.同时检测内源性凋亡相关因子Caspase3、7的活性,并利用MTT实验检测Hela细胞的存活情况.rn 结果:在实验组中Hela细胞ADAR1基因表达明显下调;在给予化疗药刺激后,实验组ADAR1较对照组的表达有明显下调,而且内源性凋亡相关基因Bcl2及Akt的表达也随之下调,凋亡相关因子Caspase3、7的活性明显升高;MTT实验结果显示实验组中Hela细胞的存活率明显低于对照组(P＜ 0.01).rn 结论:上述实验结果在细胞水平证明了ADAR1在人类宫颈癌Hela细胞中通过抑制内源性凋亡途径,促进肿瘤细胞存活.
71.截短鸭RIG-Ⅰ蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备
- 孟庆文;臧凤霞;张雅春;王伟;赵颖慧;李越;周长良;陈洪岩
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:制备抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体,鉴定其免疫学特性并建立分析检测体系.rn 方法:利用PCR技术将鸭RIG-Ⅰ基因helicase区和RD区部分编码序列分别进行扩增,并分别命名为c、d段;克隆到pET30a原核表达载体,构建了重组原核表达质粒pET30a-c和pET30a-d;通过转化BL21(DE3)感受态菌、IPTG诱导、镍柱纯化表达蛋白;将纯化的c、d蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体(mAb);采用ELISA、Western blot和IFA对单克隆抗体进行鉴定分析.rn 结果:获得鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体15株,14株与原核分段表达的c、d蛋白有良好的反应性,3株与真核表达的RIG-Ⅰ蛋白有良好的反应性.rn 结论:制备的鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体为RIG-Ⅰ在抗病毒天然免疫信号转导途径的研究奠定了基础.
72.肝肿瘤线粒体功能障碍及抗氧化应激机制探讨
- ZHUANG Yun-fang;庄云芳;李慧玲;LI Hui-ling;YAO Liang;姚亮;CUI Hai-peng;崔海鹏;DONG Jian-yi;董建一;CHEN Jun;陈军;WANG Fu-jin;王福金;王爱国;WANG Ai-guo;WANG Jing-yu;王靖宇
- 《中国北方第十三届实验动物科技年会》 | 2015年
摘要：目的:探讨癌基因Ras诱导小鼠肝组织中线粒体功能障碍及肝肿瘤细胞抗氧化应激的分子作用机制.rn 方法:采集H-ras12V转基因肝癌雄性小鼠的肝癌组织和癌旁组织及正常对照雄性小鼠的正常肝组织,比色法定量检测试剂盒检测组织中线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性;转录组测序和RFQ-PCR法检测组织中线粒体复合物关键酶及Bcl-2和Ucp2的mRNA表达水平;免疫荧光测定试剂盒检测组织中的ROS水平.rn 结果:与正常对照雄性小鼠肝组织相比,转基因雄性小鼠肝癌组织和癌旁组织的复合物Ⅰ活性均显著降低,F=14.26,P=0.003.呼吸链复合物Ⅰ/Ⅲ/Ⅳ关键酶的mRNA表达水平检测结果表明,与正常对照组相比,肝癌组织和癌旁组织的duf12、Ndufs6、Uqcrb、Cox7a2表达水平均显著降低,统计量分别为F=18.55,P=0.001;F=7.06,P=0.014;F=12.81,P=0.002;F=10.51,P=0.004.免疫荧光检测表明,与正常对照组和肝癌组织相比,癌旁组织中的ROS水平显著升高,F=31.35,P=0.001.与正常对照组和癌旁组织相比,肝癌组织中的Bcl-2和Ucp2表达水平均显著升高,统计量分别为F=20.29,P=0.002;F=15.51,P=0.001.rn 结论:Ras癌基因的表达直接下调了肝组织线粒体呼吸链复合物关键酶的表达,进而导致线粒体功能障碍并提升细胞内ROS水平.肝癌细胞通过促进Bcl-2和Ucp2的表达降低线粒体产生的ROS,进而促进肝癌的发生发展.