鹅绒藤全植株中巯基蛋白酶的提取、纯化及部分性质研究

摘要

为了从鹅绒藤( Cynanchum chinese R.Br.)全植株中提取、纯化巯基蛋白酶并进行部分性质研究,采集全植株,粉碎后用盐析、凝胶层析、离子交换层析方法纯化蛋白酶.结果,得到两种活性蛋白,其中一种经SDS-PAGE鉴定为均一条带,分子质量15.8KD;作用最适pH 7.0,最适温度50℃.对Hb A -β链水解的Km值为1.23×10-6 mol/L.巯基酶抑制剂、保护剂实验提示该酶为巯基蛋白酶.结论,实验流程简洁可行,提纯得到的蛋白酶纯度较高、得率中等.