地高辛下调缺氧诱导因子-1α的表达抑制结直肠癌HCT116细胞上皮间质化和迁移能力

摘要

目的 探究地高辛下调缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达对结直肠癌HCT116细胞上皮间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和迁移能力的影响.方法 将细胞分为常氧环境组(Normoxia组)、低氧环境组(Hypoxia组)、低氧环境+地高辛组(Hypoxia+Digoxin组)、阴性对照组(si-NC组)和HIF-1α干扰RNA组(si-HIF1α组).利用RNA干扰(ribonucleic acid interference,RNAi)技术下调HIF-1α;采用MTT检测各组细胞的增殖;采用Transwell测量细胞的迁移能力;qRT-PCR检测HIF-1α和VEGF mRNA的表达水平;Western blot检测上皮间质化相关因子及HIF-1α、VEGF的蛋白表达.结果 qRT-PCR发现,Hypoxia+Digoxin组HIF-1α和VEGF的mRNA表达低于Hypoxia组,si-HIF1α组HIF-1α和VEGF的mRNA表达低于si-NC组(P<0.05);Western blot检测显示,与Hypoxia组相比,Hypoxia+Digoxin组E-cadherin表达增高,HIF-1α、N-cadherin、MMP2、Vimentin、SLUG和VEGF蛋白表达降低(P<0.05);与si-NC组相比,si-HIF1α组E-cadherin表达增高,HIF-1α、N-cadherin、MMP2、Vimentin、SLUG、VEGF蛋白表达降低(P<0.05);Hypoxia+Digoxin组细胞增殖能力低于Hypoxia组,si-HIF1α组细胞增殖能力低于si-NC组(P<0.05);Transwell实验发现,Hypoxia+Digoxin组迁移能力低于Hypoxia组,si-HIF1α组迁移能力低于si-NC组(P<0.05).结论 地高辛可通过下调HIF-1α表达抑制结直肠癌HCT116细胞EMT和迁移能力.