人磷酯酰蛋白聚糖3 N端融合蛋白多克隆抗体制备及鉴定

摘要

目的:制备人磷酯酰蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3) N端蛋白的多克隆抗体.方法:在大肠埃希菌Rosetta中诱导表达磷酯酰蛋白聚糖3 N端融合蛋白,从SDS-PAGE中切胶纯化,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.用辛酸-硫酸铵分步沉淀法初步纯化抗血清,并用ELISA、Westen-blot检测抗体的灵敏度和特异性.结果:成功制备了抗磷酯酰蛋白聚糖3 N端的多克隆抗体,抗体滴度为1:64 000,经Western blot检测特异性良好.结论:成功制备了抗人磷酯酰蛋白聚糖3 N端融合蛋白多克隆抗体.