不同取样和提取方法对甲状腺结节细针穿刺标本提取RNA检测目的基因的影响

摘要

目的 :比较不同取样和提取方法对甲状腺结节细针穿刺(fine needle aspiration,FNA)标本提取RNA检测目的基因结果的影响。方法:以单独穿刺与穿刺针冲洗液2种方式收取FNA标本,以TRIzol法和Qiagen法2种方法提取RNA,利用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测甲状腺细胞相关基因,比较不同方法对RNA质与量及RT-PCR结果的影响。结果:102例FNA标本均提取了RNA,RT-PCR结果显示,GAPDH的检出率达97.06%,TG为93.14%,其余依次为TPO、TSHr、NIS。在单独穿刺样本中,TRIzol法提取的RNA浓度及总量均大于Qiagen法,但差异未达统计学意义(P>0.05)。2种方法所提取RNA的吸光度值及PCR成功率也无统计学差异(P>0.05)。在冲洗液标本中亦未发现Qiagen法与TRIzol法在RNA浓度、总量、吸光度值及PCR成功率之间有显著差异(P>0.05)。在TRIzol组中,单独穿刺与穿刺针冲洗液2种取样方式对其RNA浓度、RNA总量、吸光度值以及PCR成功率的影响均无统计学意义(P>0.05)。在Qiagen组中,不同取样方式对其RNA浓度、RNA总量、OD值以及PCR成功率的影响亦无统计学意义(P>0.05)。结论:FNA标本可以成功提取RNA并进行基因检测。单独穿刺、穿刺针冲洗液2种取样方式以及TRIzol法、Qiagen法2种RNA提取方法均可用于FNA标本RNA的提取。