细胞型朊蛋白对人结肠癌细胞株HT29细胞增殖及化疗敏感性的影响

摘要

目的探讨细胞型朊蛋白(cellularprionprotein,PrPC)对人结肠癌细胞株HT29细胞增殖及化疗敏感性的影响,为结肠癌的临床诊治提供策略。方法 构建滴度合格的PrPC干扰慢病毒LV582-1、LV582-2和LV582-3侵染结肠癌细胞株HT29,分别设置为干扰组1、干扰组2及干扰组3,阴性慢病毒侵染HT29作为对照组,采用qPCR和Westernblot技术检测结肠癌细胞株中PrPC的表达,CCK8检测[顺铂处理组(干扰+顺铂处理组、对照+顺铂处理组),无顺铂处理组(干扰组、对照组)]细胞的增殖效率。结果 qPCR检测结果显示,干扰组3(PrPCmRNA为22.22±0.32)的干扰效率最高(为74.297%),提示LV582-3可有效抑制结肠癌细胞株PrPCmRNA的表达;Westernblot结果显示干扰组3细胞中PrPC蛋白表达水平低于对照组(P<0.05);CCK8结果显示,干扰组与对照组细胞增殖效率差异无统计学意义(P>0.05),但顺铂处理组与无顺铂处理组相比较,前者明显不利于细胞增殖(P<0.01),且干扰+顺铂处理组与对照+顺铂处理组相比较,前者更加不利于细胞增殖(P<0.05)。结论 下调PrPC表达对HT29细胞增殖无显著影响,但可以增加细胞对化疗药物顺铂的敏感性。