骨桥蛋白与乳腺癌细胞体外形成血管生成拟态的关系

摘要

目的探讨骨桥蛋白（OPN）在乳腺癌细胞血管生成拟态（VM）的形成中的作用,及其与MMP-9和血管内皮生长因子（VEGF）的关系。方法实验分为转染组（miR-opn2组）和3个对照组[正常对照组（control组）、转染试剂对照组（LipLTX组）、阴性质粒对照组（miR-neg组）],分别转染MDA-MB-231细胞株30h后,收集细胞进行体外三维培养,24h后行PAS染色,显微镜下观察各组VM的数量,提取各实验组细胞,采用RT-PCR、WesternBlot测定OPN、MMP-9和VEGF的mRNA和蛋白质的表达。结果 miR-opn2组的MDA-MB-231细胞株形成VM的数量,OPN、MMP-9和VEGF的mRNA和蛋白表达水平较3个对照组的明显减少（P〈0.05）,3个对照组组间相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论体外三维培养模式中人乳腺癌细胞株MDA-MB-231能够形成典型VM现象,靶向沉默OPN蛋白能够有效抑制体外三维培养模式中MDA-MB-231形成VM的数量,可能与其下调了VM相关蛋白MMP-9和VEGF的表达有关。