骨桥蛋白在卵巢癌细胞体外血管生成拟态形成中的作用

摘要

目的:观察骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)在卵巢癌血管生成拟态(Vasculogenic mimicry,VM)形成中的作用,及其与MMP-2、MMP-9及NF-κB表达的关系。方法:参照GenBank上的序列构建OPN-shRNA慢病毒,感染SKOV3细胞,q-PCR及WesternBlot筛选获得最佳干扰效果的shRNA。体外三维培养慢病毒感染的SKOV3细胞,48h后观察各组VM形成数量;提取各组细胞,采用WesternBlot测定MMP-2及MMP-9蛋白的表达情况。结果:构建三组干扰组中,shRNA-1对OPN干扰效果最好。shRNA-1组形成的VM数量、MMP-2及MMP-9蛋白表达水平较2个对照组的明显减少(P<0.05)。结论结论:体外三维培养人卵巢癌细胞株SKOV3能够形成血管生成拟态,慢病毒感染沉默OPN蛋白能有效抑制体外三维培养SKOV3形成VM的数量,可能与其下调了相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达有关。