靶向抑制肝癌耐药细胞多药耐药基因表达的实验研究

摘要

目的:构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(short hairpin RNA, shRNA)表达质粒,并观察其对肝癌耐药细胞Bel-7402/R的MDR1 mRNA的抑制作用.方法:利用分子克隆技术,将含MDR1的双链DNA,与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株BEL-7402/R, RT-PCR分析MDR1mRNA的表达,流式细胞仪检测细胞P-gp的表达.结果:PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制MDR1mRNA的表达; P-gp的表达阳性率降低了57.3%,P<0.05.结论:构建的pshRNA-MDR1表达质粒能靶向抵制肝癌耐药细胞MDR1mRNA和P-gp的表达.