miR⁃26a靶向ADAM10对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及迁移的影响

摘要

目的 探讨miR?26a对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖及迁移的影响及分子机制.方法 实验设置对照(Con)组、脂多糖(LPS)组、LPS+miR?NC组、LPS+miR?26a组、LPS+pcDNA 3.1组、LPS+pcDNA3.1?ADAM10组、LPS+miR?26a+pcDNA3.1组、LPS+miR?26a+pcDNA3.1?ADAM10组.实时荧光定量PCR(RT?qPCR)检测miR?26a表达水平;细胞计数试剂盒8(CCK?8)检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;蛋白质印迹(Western blot)法检测解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)、细胞增殖核抗原Ki67(Ki?67)、神经钙黏蛋白(N?cadherin)、上皮钙黏蛋白(E?cadherin)蛋白表达;Transwell检测细胞迁移;双荧光素酶报告实验验证miR?26a和ADAM10的靶向关系.结果 与对照组相比,LPS组miR?26a表达水平显著降低,细胞活性显著升高,克隆形成数及迁移细胞数显著升高,Ki67、N?cadherin表达水平显著升高,E?cadherin表达水平显著降低(P<0.05).过表达miR?26a抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移.miR?26a靶向ADAM10,过表达ADAM10逆转了miR?26a对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移的抑制作用.结论 过表达miR?26a可能通过靶向下调ADAM10抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖、迁移.