IL-13 PGE2 PGI2通过PKC通路活化肝星形细胞参与肝脏纤维化作用研究

摘要

目的 研究白介素-13(IL-13)、前列腺素E2(PGE2)和前列环素(PGI2)在肝星形细胞(HSCs)参与肝脏纤维化中的作用.方法 通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot-ting)、蛋白激酶C(PKC)活性检测和BrdU检测,检测了IL-13、PGE2和PGI2对转化生长因子-β1(TGF-β1)和血小板衍生生长因子(PDGF)在人HSCs中mRNA和蛋白水平的影响,以及对细胞活性及PKC活性的影响,另外,通过加入PKC的激动剂和抑制剂来研究其对TGF-β1和PDGF表达的影响.结果 IL-13、PGE2和PGI2显著提升了TGF-β1和PDGF在人HSCs中的表达量及分泌量,同时也提高了HSCs的增殖能力和细胞活性.在IL-13、PGE2和PGI2的任何一个治疗组中,PKC的活性也得到明显增高.通过ELISA、Western blotting和RT-PCR检测,发现PKC的激动剂12-豆蔻酸-13-乙酸佛波醇(PMA)明显提高了HSCs中TGF-β1和PDGF的表达量和分泌量,而PKC抑制剂钙磷酸蛋白(Calphostin C)则与此相反.同时,PMA促进HSCs的增殖活性,而Calphostin C则对HSCs的增殖产生抑制.结论 IL-13、PGE2和PGI2可能通过活化PKC来刺激人HSCs的增殖及合成并释放TGF-β1和PDGF,促进肝脏纤维化的进展.