阿尔茨海默病Aβ40人单链抗体在毕赤酵母的表达

摘要

目的 重组表达抗Aβ40的人单链抗体,为被动免疫治疗阿尔茨海默疾病提供研究材料.方法 将从人噬菌体单链抗体文库中筛选获得的抗Aβ40人单链抗体基因,突变BamHI酶切位点,克隆连接到T载体,经过PCR和酶切鉴定.EcoRI和Notl双酶切pT-scFvAβ40质粒,连接到经过同样酶切的pPIC9K载体构建pPIC9K-scFvAβ40质粒,经过基因测序验证.线性化pPIC9K-scFvAβ40,转化GS115毕赤酵母,经0.5%甲醇诱导表达抗Aβ40的人单链抗体.结果 基因测序证实pPIC9K-scFvAβ40序列正确,转化GS115获得重组菌株.经过0.5%甲醇诱导,重组菌株分泌表达分子质量大小约为33kD的蛋白质.结论 成功构建pPIC9K-scFvAβ40质粒,Aβ40的人单链抗体在毕赤酵母系统得以重组表达.