优化整体原位杂交方法检测基因在幼鼠大脑中的表达

摘要

目的 优化整体原位杂交方法,用于检测基因在幼鼠大脑中的时空表达分布.方法 通过摸索最佳蛋白酶K的消化时间,改良杂交缓冲液成分,并延长杂交时间和漂洗时间,对整体原位杂交方法进行优化,并用优化的方法检测了Cdh6、Bhlhb5和Lmo4 mRNA在出生后7天的小鼠大脑中的整体表达分布.结果 采用优化的整体原位杂交方法成功地检测了3种mRNA在幼鼠全脑的区域性表达特征,特异性杂交信号强,非特异性背景低.结论成功优化了幼鼠全脑原位杂交方法,为开展后续的研究打下基础.