DNA免疫制备肝特异新基因FF456抗体及其应用

摘要

目的:制备FF456抗体,并研究FF456在正常肝组织和肝癌组织中的表达情况和分布. 方法:将FF456全长基因克隆于pCDNA3.1(-)真核表达质粒,直接免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,并对DNA的免疫条件进行优化.同时通过原核表达体系表达一段含FF456特异序列的肽段.利用该肽段作为抗原,检测DNA免疫得到的FF456抗血清的滴度及特异性,最后利用FF456抗血清对正常肝组织和肝癌组织进行免疫荧光染色. 结果:western blotting及ELISA结果表明,DNA免疫得到的FF456抗血清特异性良好,最大抗血清滴度为50 000左右. 结论:FF456在正常肝组织中广泛表达,在肝癌组织中的表达量明显下调.