缺氧诱导因子1表达抑制使缺氧-复氧的PC12细胞氧自由基生成增加

摘要

目的:研究PC12细胞化学性缺氧-复氧以及缺氧诱导因子1α(HIF1α) 反义寡核苷酸对HIF1α蛋白表达和氧自由基生成的影响. 方法:制造化学缺氧-复氧模型,用含或不含氯化钴的DMEM培养液孵育PC12细胞.封闭HIF1α基因表达,用含HIF1α反义寡核苷酸和氯化钴的DMEM培养液孵育PC12细胞.HIF1α寡核苷酸进行同样处理和只用含氯化钴的DMEM培养液孵育PC12细胞作为对照.采用免疫细胞化学染色法检测HIF1α蛋白表达,并用激光共聚焦显微镜进行半定量.检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量,间接反映氧自由基的生成量. 结果:与缺氧组相比,缺氧-复氧组复氧后HIF1α蛋白表达受到抑制,同时氧自由基生成增加.HIF1α反义寡核苷酸亦可抑制HIF1α蛋白表达和升高氧自由基水平. 结论:抑制HIF1α的表达可导致氧自由基大量生成,加重缺氧-复氧PC12细胞的损伤.