人HP1α/pEGFP-N1真核表达载体的构建及其表达和定位

摘要

目的:用增强型绿色荧光蛋白作为标记物,观察人类异染色质相关蛋白HP1α在HeLa细胞中的表达及定位。方法:用RT-PCR方法扩增获得HP1α基因编码序列,将其定向克隆至含增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)的真核表达载体pEGFP-N1中,构建HP1α/p EGFP-N1荧光蛋白融合基因表达载体。并由脂质体介导将其转染HeLa细胞,荧光显微镜观察其表达情况及亚细胞定位。结果:双酶切与测序结果表明目的基因序列完全正确;荧光观察结果证实HP1α主要存在于细胞核内。结论:成功构建了目的基因HP1α的真核表达载体,并在HeLa细胞中获得有效表达和定位。