人源性Notch1胞内段真核表达载体的构建

摘要

目的构建人Notch1胞内段(Notch1 intracellular domain,NICD)真核表达载体pcDNA3.1-NICD。方法通过逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术从人胃粘膜上皮细胞(GES-1细胞)中获得编码NICD的cDNA,将扩增产物克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)myc-his B,酶切和测序鉴定重组质粒。结果 RT-PCR扩增NICD基因得到2391bp片段,与预期的NICD片段大小一致。酶切和测序鉴定NICD的真核表达质粒pcDNA3.1-NICD构建成功。结论成功构建了人Notch1胞内段真核表达质粒pcDNA3.1-NICD,为研究Notch信号通路在人胃癌发生发展中的作用机制奠定了基础。