巨噬细胞刺激1受体抑制剂BMS777607对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的:探讨巨噬细胞刺激1受体(MST1R)抑制剂BMS777607对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,阐明其可能的机制.方法:选择人肺癌A549细胞,不同浓度(1、5、10、15和20 μmol· L-1)BMS777607处理细胞48 h,同时设对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖率;不同浓度(1、5、10、15和20 μmol·L-1)BMS777607处理A549细胞14 d,同时设对照组,采用克隆形成实验观察各组细胞克隆形成情况并检测各组细胞增殖率;不同浓度(10和20μmol·L-1)BMS777607处理A549细胞24 h,同时设对照组,采用EdU掺入法检测各组细胞中EdU阳性细胞率;不同浓度(1、5、10、15和20 μmol·L-1)BMS777607处理A549细胞48 h,同时设对照组,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;应用Western blotting法检测各组细胞中蛋白激酶B (AKT)、磷酸化AKT (p-AKT)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK (p-ERK)、聚酰苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、活化型PARP (Cleaved-PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase 9)和活化型Caspase 9(Cleaved-Caspase 9)蛋白表达水平.结果:MTT实验,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P＜0.05或P＜0.01),且呈浓度和时间依赖性.克隆形成实验,与对照组比较,10μmol·L-1BMS777607组细胞克隆形成数量明显减少,20 μmol·L-1BMS777607组细胞几乎无克隆形成;与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞增殖率明显降低(P＜0.05或P＜0.01).EdU掺入法实验,与对照组比较,10和20 μmol·L-1BMS777607组细胞中EdU阳性细胞率均明显降低(P＜0.05或P＜0.01).双染流式细胞术检测,与对照组比较,10、15和20μmol·L-1 BMS777607组A549细胞凋亡率明显升高(P＜0.05).Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度BMS777607组细胞中p-AKT和p-ERK蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase 9蛋白表达水平明显升高(P＜0.05).结论:MST1R抑制剂BMS777607能够抑制肺癌A549细胞的增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与其抑制p-AKT、p-ERK表达和促进PARP、Caspase 9表达有关.