叉头蛋白3对肺腺癌细胞增殖和化疗药物顺铂敏感性的影响

摘要

目的:观察叉头蛋白3(FOXP3)在人肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞增殖和顺铂敏感性的影响,阐明肺腺癌细胞对顺铂耐药的相关机制。方法:收集肺腺癌患者术后石蜡标本50例和正常肺组织10例。免疫组织化学染色方法检测肺腺癌组织和正常肺组织中FOXP3和Ki-67的表达,分析肺腺癌组织和正常肺组织中FOXP3阳性表达率的差异,Pearson相关分析法分析FOXP3和Ki-67表达的相关性。选取对数生长期的人肺腺癌A549细胞进行siRNA转染,将A549细胞分为Mock组(转染脂质体)、Control-siRNA组(转染Control-siRNA)和FOXP3-siRNA组(转染FOXP3-siRNA)。RT-qPCR法检测各组A549细胞中FOXP3 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组A549细胞中FOXP3蛋白表达水平,CCK-8法检测各组A549细胞增殖活性及不同浓度(0、0.63、1.25、2.50和5.00 mg·L^-1)顺铂作用后各组A549细胞生长抑制率,RT-qPCR和Western blotting法检测顺铂作用后各组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平。结果:FOXP3在肺腺癌和正常肺组织的阳性表达率分别为62.0%和13.3%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);FOXP3和Ki-67在肺腺癌组织中表达呈正相关关系(r=0.370,P<0.01);FOXP3-siRNA组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平均明显低于Mock组和Control-siRNA组(P<0.01);顺铂作用48和72 h后,FOXP3-siRNA组A549细胞增殖活性明显低于Mock组和Control-siRNA组(P<0.05);1.25、2.50和5.00 mg·L^-1顺铂作用后,FOXP3-siRNA组A549细胞生长抑制率均高于Mock组和Control-siRNA组(P<0.05);1.25和2.50 mg·L^-1顺铂组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平均明显高于0 mg·L^-1顺铂组(P<0.05)。结论:沉默FOXP3可抑制肺腺癌细胞的增殖,增加肺腺癌细胞对顺铂的敏感性。