人骨髓造血基质干细胞体外增殖方法

摘要

目的:探讨使骨髓造血基质干细胞(HSSC)体外稳定增殖的方法.方法:取开胸术剪下的人肋骨(正常血象,非血液系统及恶性肿瘤病),常规制备骨髓细胞悬液,从胎牛血清及人AB型血清中选择最佳血清,人AB型血清浓度分别为5%、10%、15%、20%、30%、35%、40%.培养液分别为RPMI 1640、DMEM、IMDM以选择最佳培养液.加入人重组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行最佳浓度测定.培养物置CO2孵箱中培养2周后行HE染色,计数基质细胞集落数.结果:选择出最佳培养体系为30%人AB型血清、1 μg*L-1 bFGF、Penicillin 100 KU*L-1、Streptomycin 50 KU*L-1、氢化考的松10-6 mol*L-1和IMDM培养液.结论:选择最佳的培养体系可增加HSSC增殖数量,最宜体外培养时间(14～21 d),最大限度增加回输时的HSSC数量,使自体回输治疗急性白血病(AML)成为可能.