弓形虫GRA1基因变异及真核表达载体的构建

摘要

目的:构建弓形虫致密颗粒抗原1(GRA1)基因真核表达质粒.方法:根据GRA1基因已知序列,设计一对引物.用PCR技术从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA1基因片段,插入pcDNA3质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,经酶切及PCR鉴定、测序.结果:从弓形虫RH株基因组中扩增出775 bp的GRA1基因,测序显示该基因存在一135 bp的插入序列,使得所得PCR产物分子量大于预期值(628 bp).该插入序列造成GRA1基因移码突变.结论:首次报道了变异的弓形虫RH株GRA1基因并构建了该变异基因的重组表达质粒.