牛胰脏RNAⅡ的制备

摘要

目的:改进从牛胰脏制备RNAⅡ的方法,以降低成本,减少污染排放,提高产品的质量和收率.方法:采用酶-苯酚-氯仿-稀盐法,替代传统方法的大剂量苯酚多次萃取法从牛胰脏提取RNAⅡ.结果:采用酶-苯酚-氯仿-稀盐法制备的RNAⅡ,制剂A260/A230、A260/A280的比值分别达到2.1和1.9以上,传统工艺为1.44和1.63;DNA含量控制在2%以下,传统工艺为6.2%;有机试剂消耗降低明显,由传统工艺的18 000 mL苯酚·kg-1牛胰脏降低到600和300 mL氯仿·kg-1牛胰脏;成本由原来的253元·g-1牛胰脏核糖核酸降到11～14元·g-1牛胰脏核糖核酸.结论:采用酶-苯酚-氯仿-稀盐法制备的RNAⅡ中蛋白、多糖含量较低,纯度较传统方法有较大提高;该方法可减少有机试剂用量,减少污染排放,使生产成本大幅度下降;本工艺适合大规模生产RNAⅡ.