力达霉素抑制K562细胞增殖和诱导凋亡作用及其机制

摘要

目的:研究力达霉素(LDM)对人慢性粒细胞白血病(CML) K562细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,并探讨其机制.方法:选取处于对数生长期的人CML K562细胞,采用不同浓度(0.01、0.10和1.00 nmol·L-1)LDM处理48 h,作为0.01、0.10和1.00 nmol·L-1LDM组,不加药物的正常细胞为对照组.台盼蓝染色观察各组K562细胞生长抑制率,MTT法检测细胞存活率,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色法观察凋亡细胞的形态表现,Annexin V-FITC/PI双染结合流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞中caspase-3和caspase-8蛋白相对表达量.结果:台盼蓝染色,LDM对K562细胞增殖有一定的抑制作用,各浓度LDM组细胞生长抑制率均高于对照组(P＜0.05);MTT法检测,随LDM作用浓度的升高,细胞存活率下降,LDM对K562细胞作用的半数抑制浓度(IC50)为(0.1±3.2) nmol·L-1.AO/EB染色,荧光显微镜下观察到LDM能够引起细胞发生凋亡(胞质呈芽状突起,胞核碎裂成点状).流式细胞术检测,各浓度LDM组K562细胞凋亡率均高于对照组(P＜0.05).Western blotting法检测,0.10和1.00 nmol·L-1 LDM组K562细胞中caspase-8和caspase-3蛋白相对表达量明显高于对照组(P＜0.01).0.01 nmol·L-1 LDM组K562细胞中caspase-8和caspase-3蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:LDM能够有效抑制K562细胞增殖,低浓度LDM可能通过上调细胞中caspase-8和caspase-3表达诱导K562细胞发生凋亡.